32月季的花药培养.ppt

课题 2 月季的花药培养 课前 预习导学 目标 导航 学习目标 重点难点 1 . 说出并能作图表示被子植物花粉发育 的过程。 2 . 说出并能用流程图表示花药培养产生花粉 植株的两种途径。 3 . 说出影响花药培养的因素。 4 . 尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 重点 : 选取适宜的培养材 料和培养基。 难点 : 选取适宜的培养材料和 培养基。 预习 导引 一、被子植物的花粉发育 1 . 花粉 : 由 花粉母细胞 经过 减数分裂 形成的 单倍体 的生殖细胞。 2 . 发育过程 (1) 四分体时期 :4 个单倍体细胞连在一起。 (2) 单核期 : 细胞含有浓厚的 原生质 , 该期又可分为 单核居中期 和 单 核靠边期 两个时期。 (3) 双核期 : 细胞中含有 生殖 细胞核和 花粉管 细胞核 , 它们分别形成 一个 生殖 细胞和一个营养细胞 , 其中的 生殖 细胞形成两个精子。 二、产生花粉植株的两种途径 1 . 途径差异 : 一种是花粉通过 胚状体 阶段发育为植株 ; 另一种是花 粉在诱导培养基上先形成 愈伤组织 , 再将其诱导分化成植株。 2 . 形成原因 : 主要取决于培养基中 激素 的种类及其 浓度配比 。 三、影响花药培养的因素 1 . 影响因素 : 主要受 材料的选择 与 培养基的组成 的影响。 2 . 材料的选择 : (1) 花期 早期 时的花药比 后期 时的容易产生花粉植株。月季的培养 选择 初花 期的花药。 (2) 花粉发育时期 : 一般说来 , 选择 单核 期的花药培养成功率最高。 (3) 亲本的 生长条件 、材料的 低温预处理 以及 接种的密度 也对诱导 成功率有一定的影响。 预习交流 1 —— 花药培养的主要应用是什么 ? 植物的花药培养在育种上有特殊的意义 , 是单倍体育种的一个关 键环节。 (1) 花药和花粉是什么关系 ? 花药培养的实质是什么 ? 提示 : 花药是产生花粉的结构 , 花药由花药壁和花粉囊组成 , 花药壁 由体细胞组成 , 花粉囊中有小孢子母细胞 ( 该细胞是产生花粉的最原始 的母细胞 ) 。花药培养的实质是花粉培养。 (2) 由花药培养得到的植株是否是单倍体育种的目标植株 ? 为什么 ? 提示 : 不是。单倍体育种的目标植株为能进行正常繁殖的纯合子植 株 , 而花药培养得到的仅为单倍体植株 , 大多没有繁殖能力。 (3) 用流程图表示单倍体育种的操作流程。 提示 : 获得杂合子 → 对杂合子的花药进行培养 → 获得单倍体植株 → 用秋水仙素处理 → 获得染色体数目正常的纯合子植株 → 按照育种目 标选择 → 得到目标植株。 四、实验操作 1 . 取材 花药发育时期的确定 : 一般先将花粉染色 , 再通过 镜检 来确定花粉 是否处于适宜的发育期。染色方法有 : (1) 最常用的是 醋酸洋红 法。 (2) 若某些植物的花粉细胞核不易着色 , 需采用 焙花青 — 铬矾 法。 2 . 消毒 常用消毒液为 体积分数为 70% 的酒精 和 质量分数为 0.1% 的氯化汞 溶液。消毒时间分别为 30 s 和 2~4 min 。 3 . 接种和培养 (1) 接种要求 : 在 无菌条件 下除去花蕾的 萼片 和 花瓣 , 并立即将 花药 接种到培养基上。通常每瓶接种 7~10 个。 (2) 培养条件 : 温度在 25 ℃ 左右 , 幼小植株形成后需要 光照 。 (3) 鉴定和筛选 : 在花药培养中 , 特别是通过愈伤组织形成的花粉植 株 , 常常会出现 染色体倍性 的变化 , 因此需要对培养出的植株作进一步 的鉴定和筛选。 预习交流 2 花药长出愈伤组织或释放胚状体后 , 如何进一步处理 ? 提示 : (1) 花药长出愈伤组织后 , 要将愈伤组织及时转移到分化培养 基上 , 以便进一步分化出再生植株。 (2) 花药开裂释放出胚状体后 , 要尽快将幼小植株分开 , 分别移植到 新的培养基上 , 否则这些植株将很难分开。 课堂 合作探究 问题 导学 一、被子植物花粉发育的过程和产生花粉植株的两种途径 活动与探究 1 1 . 用流程图表示被子植物花粉发育的过程。 提示 : 小孢子母细胞 → 4 个小孢子 ( 小孢子四分体时期 ) → 1 个小孢子 ( 单核居中期 ) → 1 个小孢子 ( 单核靠边期 ) → 花粉粒 ( 双核期 ) 。 2 . 讨论植物花粉发育过程中的小孢子 “ 四分体 ” 与减数分裂过程中 “ 四分体 ” 一样吗 ? 请说明原因。 提示 : 不一样