猪elisa试剂盒操作步骤.docVIP

猪 elisa 试剂盒操 作 步 骤：1. 取出试剂盒，于室温（20-25℃）放置 15-30 分钟。实验过程应在室温（20-25℃）内进行。2. 取出酶标板，按照标准品的次序分别加入 100μl 的标准品溶液于空白微孔中。3. 空白微孔中加入 100μl 的样品，空白对照加入 100μl 的蒸馏水；4. 在各孔中加入 50μl 的酶标记溶液；（不含空白对照孔）5. 将酶标板用封口胶密封后，37℃孵育反应 1 小时；（在孵育箱中保持稳定的温度与湿度）6. 充分清洗酶标板 3-5 次，保持各孔有充足的水压；（浓缩洗涤液以 1：100 的比例与蒸馏水稀释）7. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干；8. 各孔加入显色剂 A、B 液各 50μl；（不含空白对照孔）9. 20-25℃下避光反应 15 分钟；10. 各孔加入 50μl 终止液，终止反应；结 果 判 断1. 30 分钟内在波长 450nm 的酶标仪上读取各孔的 OD 值；2. 百分结合率计算：设 S0 管计数为 B0，各标准管或样品管计数为 B，非特异管计数为 NSB，则百分结合率计算公式如下：B/ B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100%3. logit 计算:各标准点或样品管的 logit 值计算公式如下:logit=ln(B/ B0)/(1－B/ B0)4. 将标准品的 OD 均值与标准