琼脂糖凝胶电泳原理回顾.pptVIP

琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 口腔1402 精选 琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法，主要是应用琼脂糖凝胶作为支持物的电泳法，借助琼脂糖凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或者分子形状的不同，电泳速度有差异而分离，利用DNA、RNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应，达到分离混合物的目的。 与其他支持物电泳最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 精选 琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 胶床准备 静置 铺胶 凝胶准备 胶床置于电泳槽中 加电泳缓冲液 拔梳子 上样 电泳 取出凝胶 拍照 精选 琼脂糖凝胶电泳结果分析及其应用 精选 结果初步分析 数量分析：条带的宽度， 荧光的亮度。 质量分析：纯度 分子量 琼脂糖凝胶电泳结果分析 影响因素： DNA分子的大小：实验证明，DNA片段迁移距离与其分子量的对数成反比； 琼脂糖的浓度：一定大小的DNA片段在不同浓度的琼脂凝胶中，电泳迁移率不相同； DNA分子的构型：不同构型的DNA在琼脂糖凝胶中的电泳速度差别较大 精选 凝胶电泳结果分析 常见问题 原因 对策 DNA条带模糊 DNA降解 实验过程中应避免核酸酶污染。 电泳缓冲液陈旧 电泳缓冲液多次使用后，离子强度降低，PH值上升，缓冲能力减弱，从而影