第四组氢化可的松、黄体酮、雌二醇的鉴别和区分.pptVIP

? 小结 甾体激素 肾 上 腺 皮 质 激素 雄性激素 孕激素 雌激素 碳原子 数 21 19 21 18 A 环 ? 4 -3- 酮 ? 4 -3- 酮 ? 4 -3- 酮 苯 环 C 3 - 酚 OH 17 位取代基 ? - 醇酮基 ? -OH ? -CH3 甲酮基 ? -OH ? -C ≡CH 共同点 与强酸的呈色反应 H SO H PO 甾体激素 2 4 3 4 呈色 HClO 4 HCl 类药物 与硫酸呈色操作简便，依 颜色与荧光可区别，反应灵敏， 为各国药典所用。 如中国药典：氢化可的松， 取本品 2 mg ，加硫酸 2 ml 溶解， 放置 5 分钟，显棕黄至红，并显 绿色荧光，将此溶液倾入 10ml 水中，即变黄色至红色，同时 有少量絮状沉淀生成。 与硫酸显色反应 显 色 荧光 醋酸可的松 黄或微 无 带橙色 加水稀释 褪色并澄 清 鉴别方法 1 、 用 UV 法区分雌二醇和氢化可的松、 黄体酮 规定最大吸收波长 最大吸收波长处的吸收度 某两个吸收波长处吸收度的比值 C ? C ? C ? O ４ △ -3- 酮 C ? C ? C ? C ? C ? C 苯环 约 280nm 约 240nm 2 、 用异烟肼比色法区分雌二醇和氢 化可的松、黄体酮 原理 ： C 3 －酮基及某些其他位置上 的酮基能在酸性条件下与羰基试剂 异烟肼缩合，形成黄色的异烟棕， 在一定波长处具有最大吸收 C 3 －酮基 异烟肼 HCl （缩合） 异烟棕（黄色） OH CONHN N 异烟腙（黄色） 3 、 区分氢化可的松和黄体酮 亚硝基铁氰化钠是黄体酮专属而灵敏的反应 黄体酮 其他甾体 亚硝基铁氰化纳 蓝紫色 亚硝基铁氰化纳 淡橙色 不显色 Kober 反应比色法 1. 原理 雌激素（如雌二醇）与硫酸 乙醇反应呈色 雌激素 ? ? ? ? ? ? ? 黄色 ? ? ? ? 桃红 H ? SO ? ? 乙醇 H ? O △ △ λ max =465 λ max =515 反应条件 ? A 环是芳环，在 C 2 或 C 3 有含氧取代 ? D 环的 C 17 有含氧取代（－ OH,-C=O ） ? C 13 必须有角甲基 存在的问题 ? 双变色，测定结果重现性不好 ? 杂质干扰（赋型剂、稳定剂有干扰） 解决方法 ? 用该法测定雌激素类药物制剂的 含量时比色测定前采用分离提取 ? 严格控制反应条件 ? 消除背景干扰 铁酚试剂比色法 ? 铁－酚试剂替代硫酸－乙醇 3+ ? Fe 的作用： ? ①促进黄色的呈色速度和强度 ? ②促进黄色变成红色 ? ③加强红色的稳定性 ? 苯酚的作用： ? ①消除反应过程中产生的荧光 ? ②加速红色的生成 氢化可的松、黄体酮、雌二醇 药物的鉴别与区分 CH 3 O HO H OH CH 2 OH C O H H H HO 18 OH 17 H O H O 氢化可的松、黄体酮、雌二醇 三种药物同属于甾体激素类药物 C 21 11 1 2 19 18 C 20 12 17 13 16 C D 3 A 4 9 10 5 B 6 8 7 14 15 基本结构：环戊烷骈多氢菲 知识点回顾 环上双键的表示方法： ? 用“ ? ”表示 , 双键的位置写在 ? 的右 双键位置 上角。 ? ? 4 ? 5 4 5 6 5 ? 1 2 1,4 ? 5 4 10 5(10) ? 5 ? 环上取代基构型表示方法： ＊ ? 构型： ? 与母核连接的取代基 , 指向环平面的前 面时 , 为 ? 构型 . 用实线表示“ ———” ＊ ? 构型： ? 与母核连接的取代基 , 指向环平面的背 面时 , 为 ? 构型 . 用虚线表示“ ??? ” 按药理作用分类： 肾上腺皮质激素 - 氢化可的松 甾体激素 雄性激素及蛋 白同化激素 性激素 孕激素 — 黄体酮 雌激素 - 雌二醇 一、结构与性质 肾上腺皮质激素 O HO H OH CH 2 OH H O H 氢化可的松 1. 有 21 个碳原子 2. A 环△ 4 -3- 酮基 , UV 、与羰基试剂反应 3.C 17 位上有 a- 醇酮基 , 具还原性 雄性激素及蛋白同化激素 主要活性基团 4 △ – 性 质 3 – 酮 UV 、与羰基 试剂反应 可成酯 C 17 – β – 羟基 官能团的反应 1 C 17 – α – 醇酮基 还原性 A. 呈色反应 肾上腺皮质 激素药物 四氮唑盐 OHˉ 呈色 B. 沉淀反应 肾上 腺皮 质激 素药 物 氨制硝酸银 多伦试剂 Ag↓ 黑色 碱性 酒石酸铜 斐林试剂 Cu 2 O↓ 橙红色 2. C 3 – 酮基和 C 20 – 酮基 甾酮类激 素药物 羰基试剂 呈色 ＃常用的羰基试剂： 2,4- 二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼 孕