《生物分离工程》知识点整理.pdf

实用文档 生物分离工程 第一章 ( 绪论 ) 生物分离工程的定义和过程 生物分离工程定义（名词解释） ： 为提取生物产品时所需的原理、方法、技术及相关硬件设备的总称，指从发酵液、动植物 细胞培养液、 酶反应液和动植物组织细胞与体液等中提取、 分离纯化、 富集生物产品的过程。 过程： 目标产物捕获 目标产物初步纯化 ( 萃取、沉淀、吸附等方法 ) 目标产物高度纯化和精制 细胞分离三种手段 ： 重力沉降 离心沉降 过滤 第二章 离心分离原理和方法： 原理： 离心沉降是在离心力的作用下发生的。 单位质量的物质所受到的离心力： 式中： r 为离心半径，即从旋转轴心到沉降颗粒的距离； ω为旋转角速度； N为离心机的转数， s －1 方法 ：（1）差速离心分级 （2 ）区带离心（差速区带离心 、 平衡区带离心） 离心分离设备 ： 离心力（转速 ) 的大小 ：低速离心机、 高速离心机、 超离心机 按用途：分析性 、制备性 按工业应用 ：管式离心机 、 碟片式离心机 实验室用以离心管式转子离心机 ，离心操作为间歇式 悬浮液的预处理方法和目的 ： 方法 ： 1. 加热：最简单和最廉价的处理方法。黏度、促凝聚、固体成分体积、破坏凝胶结构、 增加空隙率 调 pH 值：方法简单有效、成本低廉 2. 凝聚：在凝聚剂 ( 如铝盐、铁盐、石灰和 NaCl) 作用下，细胞蛋白质等胶体去稳定，并 聚集成 1mm大小的凝聚块的过程。 （机理：破坏双电层，水解后胶体吸附，氢键结合等） 3. 絮凝：在絮凝剂高分子聚合电解质的作用下，胶体颗粒和聚合电解质交连成网，形成 10mm大小的絮凝团过程。 （机理：絮凝剂主要起中和电荷、桥架和网络作用） 文案大全 实用文档 4. 惰性助滤剂：一种颗粒均匀、质地坚硬的粒状物质，用于扩大过滤表面的适应范围， 减轻细小颗粒的快速挤压变形和过滤介质的堵塞。 （ 使用方法：预涂层；按一定比率混合。 助滤剂种类：硅藻土、纤维素、未活化的炭、炉渣、重质碳酸钙等。 ） 目的 ：提高过滤速度和过滤质量是过滤操作的目标。 各种细胞破碎技术原理和优缺点 ： 原理： 许多生物产物在细胞培养过程中保留在细胞内， 需破碎细胞， 使目标产物选择性地 释放到液相。破碎的细胞或其碎片去除后，上清液用于进一步的分离纯化。 细胞破碎技术分为：机械破碎法、化学法、物理渗透法 机械法和化学法的比较 机械破碎法缺点： A 、高能、高温、高噪音、高剪切力，易使产品变性失活； B 、非专一性，胞内产物均释放，分离纯化困难； C 、细胞碎片大小不一，难分离。 化学破碎法缺点： A 、费用高； B 、化学或生化试剂的添加引起新的污染； C 、破碎速度低，效率差，一般只有有限的破碎，常与机械 法连用。 物理渗透法 优点：条件比较温和，有利于目标产物的高活力释放回收。 缺点：破碎效率较低、产物释放速度低、处理时间长、不适于大规模细胞破碎，局限于实 验室规模的小批量使用。 包含体的解决方法（一般步骤） ： （一）包含体的分离纯化 （二）包含体溶解（可溶性变性、还原蛋白质） （三）变性蛋白质的复性和重新氧化 （四）蛋白质一般的分离纯化 第三章 沉淀的概念与结晶的区别： 沉淀： 沉淀是物理环境的变化引起溶质溶解度降低、生成固体凝聚物的现象。具有浓缩与分离的 双重作用。 联系： 在