离子通道课件讲解.ppt

（ 1 ）玻璃微电极使用硬质有芯玻璃毛细管在拉制仪 （ PC-10,Narishige ）上拉制，实验前用抛光仪（ MF- 900 ， Narishige ）进行抛光。 （ 2 ）通过显微操作系统将电极在加正压情况下轻微压在 细胞上，再加以负压使电极尖端与细胞膜形成高阻封接。 一般情况下，高阻封接在 1-3G Ω之间，刺激电压从 - 190mV 逐级去极化到 +110mV ，每级为 +20mV ，维持时 间 3 秒，频率为 0.2Hz 。全细胞封接形成 10 分钟后采集数 据。 膜片钳实验 植物细胞离子通道 植物根系不仅从土壤中吸收水分，还要吸收各种矿质 元素，以维持正常的生命活动，促进植物的生长发育目 的获得高产优质 ? 如：小麦、水稻、玉米、烟草、蔬菜 、水果等 植物吸收矿质元素首先细胞从环境中吸收，这个环境可 以是植物的生存外部环境，如土壤，也以是植物本身的 内部环境 ? 肥料→离子→吸附→交换→细胞 被动吸收：外液浓度＞细胞浓度 吸收 主动吸收：外液浓度＜细胞浓度 吸收 积累离子 被动吸收： ⒈扩散作用：指分子或离子沿着化学势梯度或电化学势 梯度转移的现象 ? 楞思特方程式： ⒉协助扩散：指小分子物资经膜转运蛋白顺浓度梯度或电化学势梯 度的转运 ? 转运蛋白：膜上具有转运功能的蛋白质又称传递蛋白 ? 分为二类：载体蛋白 通道蛋白 ⑴载体蛋白：是一类内部蛋白，由载体蛋白转运的物质首先与载体 蛋白的活性部位结合，结合后载体蛋白发生构象变化，被转运的物质 释放到细胞内。 载体蛋白转运物质具有饱和现象。 ⑵通道蛋白：由细胞膜中一类内部蛋白构成的孔道，或有的称膜中 由大分子组成的孔道 又叫离子通道。可被化学方式或电化学方式激活，控制离子顺势流 过细胞膜，在形成维持跨膜离子梯度和信号传导等生理过程起重要作 用。 检测：膜片钳技术 取几平方微米细胞膜或者全细胞膜，测定跨膜离子电流的大小，即 在保持跨膜电压恒定的条件下，测定通过膜上离子通道的离子流大小 。 其原理，欧姆定律 ： 分析膜上的离子通道，细胞间的离子运输，气孔运动，光受体， 激素受体，及信号传导，广泛应用。 细胞壁 液泡 叶绿体 植 物 细 胞 膜 系 统 质膜 叶绿体、线粒体 等其他细胞器膜 液泡膜 植物吸收离子涉及到质膜上的转运蛋白。膜转运蛋白分为 两类： ⑴载体蛋白也称载体或转运体。它与特定的离子结合，发 生构象变化，把离子转运过膜。 ⑵通道蛋白也称离子通道是由膜中大分子组成的孔道或是 由膜中一类内在蛋白组成的孔道。当这些通道打开时，准 许特定的离子跨膜通过。 植物离子通道的概念 1. 离子转运的被动性 2. 离子的选择性和导度 ( 离子导度：离子跨 暯 的能力，电阻的 倒数，反应通过离子通道通过离子多少。 ) 3. 通道门控特性 4. 离子转运的高效性 5. 饱和现象 （离子跨膜运输可 分 为被动运输和主动运输 两类。由 扩散作用或物理 过程所决定的运输属于被动运 输；逆浓度梯度或电位梯度 运输 ，需要消耗能量属于主 动运输。离子通道 与载体蛋白都能准许离子沿浓度梯度或 电势梯度扩散，但二者的转运离子的速度有明显差异。载 体蛋白每秒可转运 10 4 -10 5 个离子，转运效率低，而离子通 道秒可转运 10 6 -10 7 个离子，高出 100 ﹣ 1000 倍，转运效率 高。原因：经载体蛋白转运离子需要与特定的离子结合， 结合的部位数量有限，具有饱和现象，而离子通道则没 有。） 植物离子通道的特点 ? 根据影响离子通道开放的条件可将离子通道分为三大类 : ? ( 1) 电压依赖性 : 这种离子通道的开启和关闭状态取决于膜电位的电 压。细胞内钠、钾、钙、氯通道都属于电压依赖性通道。 ? ( 2) 配体门控性 : 这种离子通道的开启和关闭取决于各种递质与通 道上受体的结合状态。例如神经细胞膜上的乙酰胆碱受体通道 , 该 通道的递质为乙酰胆碱 , 其与特异性受体结合时则通道开放 , 解离时 则关闭。 ? ( 3) 机械敏感性 : 由细胞膜表面的应力变化控制通道的开放与关闭 状态。 其中以电压依赖性通道最常见 ? 根据生物学功能的特性将离子通道分为三类 : ? ( 1) 电压门控