病理标本规范化前处理要求.ppt

病理标本规范化前处理要求 病理检查申请单及 标本签收 标本固定的重要性 标本规范化前处理 示例 术中病理标本送检 标本固定的重要性 ? 标本处理：及时，冷缺血时间﹤ 1hr ? 标本离体后 60min 内固定 1 ～ 3 ? （胃与结直肠为空腔器官，有较多消化液和胃酸，肿瘤表面多有坏死，建议 30min 内固定） ? 离体实践超过 60min ，将导致组织蛋白和 DNA 的降解，从而影响免疫组织化学和分子 检测的结果 ? 手术切除大标本或有包膜的组织必须剖开 固定 1. 中国乳腺癌 HER2 检测指南 2014 版 2. 中国胃癌 HER2 检测指南 2016 版 3. 肿瘤病理诊断规范（结直肠癌） 标本固定 - 及时固定 ? 甲醛是通过与蛋白上氨基交联作用而发挥固定的功能 ? 固定液须使用 10% 中性缓冲福尔马林液（ 4% 中性甲醛溶液） 10 %NBF 配方 1000m l 福尔马林（ 40% 甲醛） 100ml 磷酸二氢钠一水合物 4.0g 磷酸氢二钠 6.5g 蒸馏水 900ml 调 pH 至 7.0 ? 如条件允许，可考虑使用商 品化固定液 标本固定 - 固定液 组织未切开固定导致不同区域染色结果不同 PMS2 表面固定良好 中央固定不良 标本固定 - 不规则处理标本的后果 免疫组化 固定时间不足对 HER2 检测的影响 标本固定 - 不规则处理标本的后果 FISH 2 脱钙方法： 骨片悬于脱钙液中，敞开瓶口， 每日更换一次新液，最好早晚各一次。 2 、螯合剂脱钙 速度很慢，但对组织成分几乎没有损 害。 用于 免疫组化染色 较理想。 （ 1 ）脱钙液配制 ：取乙二胺四乙酸二钠 （ EDTA ） 25g ，溶解于 200ml 蒸馏水中， 氢氧化钠 （ NaOH ） 调整 pH 至 7.0 （大约加 2.5g NaOH ）。 EDTA 与钙可 形成一种可溶性非离子化的复合物。 （ 2 ）脱钙法： 将骨片浸入脱钙液中，每周更换一次 新液。一般致密骨脱钙需要 6 ～ 8 周 ，含有少量骨 渣的组织约需一周。 脱钙后的处理 1 、 脱钙后的组织经 流水冲洗 4 ～ 12 小时 ，除去残留的 脱钙剂； 2 、 修去锯面的薄层组织，切成适当大小的组织块， 进行 常规脱水、透明、浸蜡及包埋 ； 3 、 用酸性液脱钙后的组织， 苏木素 染色时间应适当延长，在伊红中的 时间应该缩短； 4 、 脱钙后组织切片在染色中较易脱落， 充分烤片 ， 以使之粘贴牢固。 标本规范化前处理示例 乳腺 标本切开 放入固定箱 纱布分隔 加固定液，过夜固定 规范化前处理 - 乳腺 将乳腺每隔 5mm 切开 用纱布或滤纸将切开的乳腺 分隔 将标本皮肤面向上放入固 定箱 标本上加盖蜡板，倒入足量 固定液至蜡版浮起 粘贴标本袋，过夜固定 标本剪开 纱布分隔 肿块切开 订板 放入固定箱 加固定液，过夜固定 规范化前处理 - 胃 沿胃大弯侧剪开，洗净胃 内容物、血、粘液 将肿块切开 用图钉将标本固定于蜡板之上 , 用纱布将切开的肿块分隔 将蜡板反置于固定箱，加固 定液 加固定液至蜡板浮起 粘贴标本袋，过夜固定 标本剪开 纱布分隔 肿块切开 订板 放入固定箱 加固定液，过夜固定 规范化前处理 - 结直肠 由肿块对侧打开肠管，用清水 洗净肠内容物 沿长轴将肿块切开 用图钉将标本定于蜡板上， 并用纱布将切开的肿块分隔 将蜡板反置于固定箱，加入 固定液 加固定液至蜡板浮起 粘贴标本袋，过夜固定 标本未剪开，肿瘤组织未得到有效固定 不规范操作 固定液的量严重不足，造成组织干涸、腐败 不规范操作 小标本规范化固定 使用塑料瓶 / 玻璃瓶固定 塑料袋容易造成组织贴壁而固定不佳 小标本不规范化固定 病理检查申请单及标本签收 ? 基本信息 ：患者姓名、性别、年龄、住院号、送检医生 ? 临床信息 应包括患者的主要临床表现、临床诊断意见、特殊检 查要求、患者重要的诊疗过程等 eg ：乳腺癌患者是否做过 MMT