2020年新版消毒剂消毒效果验证方案.docxVIP

1、 验证方案的起草 起草人 咅 日期 2、 验证方案的审批 审核人 咅 日期 3、 验证方案的批准 批准人 批准日期 精选资料，欢迎下载 精选资料，欢迎下载 精选资料，欢迎下载 精选资料，欢迎下载 目录 前言 职责 验证的方法及步骤 异常情况及偏差处理 5. 验证结果评价及建议 6、再验证周期 前言 消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染 的一种化学剂。由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种 以上的消毒剂。交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应 性。本实验方案针对①75聽醇、②1瀏洁尔灭、③3%甲酚皂杀菌剂、④3%勺过氧化氢 溶液共4种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。 1.1验证的目的 本验证的目的在于制定方法及可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。 1.3验证的范围 75聽醇、1獅洁尔灭、3和酚皂溶液、3%勺H2O2 1.4验证内容： 本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然 后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留 微生物限度检查。通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限 度来确认消毒剂的消毒效果。 职责 2.1验证小组成员： 部 门 人员 2.2职责 2.3验证进度 验证方法及步骤 3.1实验材料 3.3.1菌株 细菌：金黄色葡萄球菌 (ATCC6538) 铜绿假单胞菌(ATCC15442) 大肠杆菌 （ATCC25922） 伤寒杆菌 （ATCC6539） （2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢 （ATCC9372） （3）真菌：白色念珠菌 （ATCC10231） Q Q O H * 培养基 无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基（TSA）、营养肉汤培养基。 稀释液： 1%蛋白胨 -0.03mol/L PBS 溶液 中和剂： 0.1%卵磷脂 +1%吐温 80 溶液； 0. 5%硫代硫酸钠（ 3%过氧化氢） 无菌试管 无菌平皿 （90mm） 消毒剂： 75%乙醇、 1%新洁尔灭、 3%甲酚皂溶液、 3%的 H2O2 移液器及配套无菌吸头 :0-100ul ， 100-1000ul 中和剂效力确认 ①中和剂效力及毒性试验目的 在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作 用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物及其数量。因为消毒体系中残留的消 毒剂，可能对微生物的生长繁殖具有一定抑制作用，从而可导致对杀菌效果偏高的错误 判断，甚至产生假阴性结果。残留消毒剂的去除，可排除残留消毒剂对微生物的抑制， 从而使试验获得正确结果。中和法是指在消毒剂与微生物作用到达规定时间的终点时， 取样加于适宜种类和浓度的中和剂中，将残留消毒剂迅速中和，使其不再持续抑制或杀 灭微生物的方法。本试验中所使用的中和剂必须既能有效抑制消毒剂的杀菌性（中和剂 的效力试验）同时又不削弱微生物活力的恢复（中和剂的毒性试验） 。 ②中和剂效力、毒性确认 用稀释剂将试验菌制成5X 105?5X 106cfu/ml的的菌悬液备用。 准备无菌试管 6 支，按表一试验操作步骤表分组进行操作。各组试昝充分震荡放置 于振荡器震荡至少 20 秒或在手掌上振敲 80 次，然后移取 Iml 混合液到平皿中做平皿计 数，轻轻转动平皿以使菌落在培养基表面均匀分散开来， 每组做两皿平皿， 并做好标记。 平皿在层流台下吹干，倒置于 37C下培养48小时后计数。具体结果见附件一中和剂中 和效力评估测试记录 表一中和剂效力、毒性确认试验操作步骤及结果判断 分组 试验操作 试验目的 试验结果判断 A 4.5ml消毒剂+0.5ml菌悬液作用10min取0.5ml作用液 一.5ml 稀释 ? 液试管中混匀，吸取 1ml最终作用液于平皿中，做活菌计数。 观察消毒剂对试验菌有无杀 火或抑制能力。 应无试验菌生长或极少数菌落生长 B 4.5ml消毒剂+0.5ml菌悬液作用lOmi; 取0.5ml作用液 f5ml 中和 剂试管中混匀，吸取 1ml最终作用液于平皿中，做活菌计数。 观察残留消毒液被中和后受 到消毒剂作用后的试验菌是 否能恢复生长。 B组菌落数比 C D E组少，并符合卜夕列 要求： A组平均菌落数 B组平均菌落数 0 5 X(1 ?10) X+5 Y( 10) Y+0.5Y C 4.5ml中和剂+0.5ml菌悬液 作用10min取0.5ml作用液—.5ml 中 ? 和剂试管中混匀，吸取 1ml最终作用液于平皿中，做活菌计数。 观察中和剂是否抑菌。 「队E纽冇相似苗潘战，孔组何閨落敎誤护 _q + \ciJE D + CDE 时 g D 4.5ml中和产物液+0.5ml菌悬液 作用10mi;取