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目的基因的连接、转化、筛选
目的
口拿目的基因的重组连接原理及方法。
口理解蓝白躔筛选鉴定的原理
口熟悉重组DNA分子转化受体细胞的基本思路和方法
实验总设让
分PCR分离目的基因
》接--目的基因与载体和连
转-转入宿主细胞
筛--筛选阳性重组体
以
◎+
◎
载体外源
重组DNA分子
DNA
质粒为載体的N克隆过程
转化或转染
88.重组DNA增殖
细菌
D
细菌在培养液
中繁殖后,在固
体培养基生长
筛选含重组
·∴·/质粒的细菌
接--目的基因与载体相连
原理:
1、DNA聚合酶反应时都有在PCR产物的3’來端娇
加一个或者几个A减基的特性
2.利用T载体3’水端的T喊基和PCR产物的A戒基
互补配对,经逄接酶作用,完成与载体的迹接
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