222动物细胞融合与单克隆抗体课件.ppt

动物细胞融合与单克隆抗体 思考： 1 、什么叫动物细胞融合？ 2 、促进细胞融合的 方法 有哪些 ? 3 、细胞融合技术最大的 优点 是什么？ 4 、植物体细胞杂交与动物细胞融合 有哪些 异同 ？ 物理法 化学法 生物法 电场法 ( 效率高、伤害小、易操作 ) （离心、振动、电刺激） 聚乙二醇（ PEG ） 灭活的病毒 （灭活的仙台病毒） ( 一 ) 动物细胞融合 （细胞杂交） 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞 总结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原 理 融合前处理 诱 导 方 法 用 途 细胞膜的流动性、 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 物理、化学方法 物理、化学、 生物 方法 获得部分 或完整植株 主要用于制备 单克隆抗体 回 顾 1 、抗体的化学本质？ 2 、抗体由什么细胞产生？ 3 、抗体的作用特点？ 4 、抗体的分布？ （二）单克隆抗体的制备 思 考： 如何获取某种特定抗体？ 1 、抗体的传统生产方法 再从动物 血清 中分离抗体 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 输入 浆细胞 动物体内 某抗体 某抗原 思考与探究： 如何获得大量化学性质单一、特异性强的抗体？ 一个 B 淋巴细胞 —— 只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞 —— 能无限增殖 杂交瘤细胞 既能分泌一种特异性抗体 又能无限增殖 1975 年英国科学家 米尔斯坦 和 柯勒 设想： 2 、单克隆抗体的制备过程 自学与思考： 1 ）在从小鼠体内取 B 淋巴细胞前应对小鼠作何种处理？ 为什么要这样处理？ 2 ）从小鼠何处获取 B 淋巴细胞？ 3 ）如只考虑两两融合，可能出现哪些融合类型细胞？ 4 ）是否所有杂交瘤细胞都能产生某一特定抗体？ 5 ）由特定的 B 淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合成的杂交 瘤细胞具有什么特点？ 6 ）最后可以通过哪些途径大量获取抗体？ 1 、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合 ? 小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖， B 淋巴细胞能够产生抗体， 细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活。 2 、骨髓瘤细胞是癌细胞吗 ? 有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞， 具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞， 所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。 2 、单克隆抗体的制备过程 思考与探究： 如何获得能产生特异抗体的杂交瘤细胞呢？ 杂交 细胞 灭活的病毒等手段 小鼠骨髓瘤细胞 B 淋巴细胞 经免疫 的小鼠 提取 杂交瘤 细胞 第一次筛选 用特定的 选 择性培养基 第二次筛选 能产生特定抗体、培养条件 下能无限增殖的杂交瘤细胞 体外培养 注射到小鼠腹腔 提取单克隆抗体