流式细胞术在肿瘤学中的应用分析解析.pptVIP

流式细胞术在肿瘤学中的应用 内容 ? 流式细胞仪概念、原理及应用 ? 流式细胞术优势 ? 流式细胞术在肿瘤学中的应用 流式细胞术（ Flow Cytometry ）是利用流式细胞仪检测细 胞或其它颗粒性物质的物理、化学特性。同时利用荧光染料 , 激光技术 , 单抗技术以及计算机技术的发展 , 大大提高了检测速 度与统计精确性 , 而且从同一个细胞中可以同时测得多种参数 , 为生物医学与临床检验学发展提供了一个全新的视角和强有 力的手段。 流式细胞术 流式细胞仪检测流程 流式细胞术优势（分析型） ? 高速测定细胞，大样本计数 ? 检测稀有细胞 ? 多参数分析 FC500 流式细胞仪 0 5000 10000 15000 Quantitative cell fluorescence Leukemia Lymphoma Dendritic cells Intracellular signal transduction Intracellular receptors Cell viability Cell adhesion A utoimmune Stem cell Organ transplantation Cell signaling Immune function A poptosis HIV A ctivation Cytokines Cell DNA Cell surface receptors 流式细胞术的应用 检测特性：大小、颗粒度 、细胞受体 / 分子、核酸 (DNA/RNA) 、蛋白…… 肿瘤学中的应用 ? 肿瘤免疫 ? 肿瘤细胞周期和凋亡 ? 肿瘤干细胞的研究 ? 血液中循环肿瘤细胞的研究 ? 肿瘤免疫学 天然免疫 ? 中性粒细胞 ? 嗜酸性细胞 ? 嗜碱性细胞 ? 单核细胞 / 巨噬细胞 ? 树突细胞 : mDC - pDC ? NK 细胞 ? NKT 细胞 ? ?? T 淋巴细胞 ? CD5+ B 细胞 获得性免疫 ? B 细胞 ? 辅助性 T 细胞 – Th1 – Th2 ? 细胞毒 T 细胞 ? 调节性 T 细胞 淋巴细胞免疫分型 ● T 细胞： CD3 + CD4 + (Th ， Treg) CD8 + (Tc) ● B 细胞： CD19 + ● NK 细胞： CD3 - CD56 + 肿瘤细胞免疫特点 CD3 CD4 CD8 CD4/CD8 NK CIK 正常 正常 正常 正常 正常 正常 正常 正常 正常 正常 正常 Th1Th2 细胞因子分泌细胞测定 Th1 细胞： 介导细胞免疫、细胞毒性 T 细胞的生长和活 化、巨噬细胞的活化、介导迟发型过敏反应。其功 能亢进将导致炎症慢性迁延，器官特异性自身免疫 病，急性排异反应和接触性皮炎等的发病和免疫病 理损伤。 Th2 细胞 ： 介导体液免疫，促进 B 细胞的生长、活化和 分化，是 IgG1 和 IgE 类抗体的转换因子，其功能亢 进将导致特异性过敏反应，参与高 IgE 综合症和嗜 酸性粒细胞增多症。 Th1/Th2 漂移与肿瘤免疫 肿瘤可使 Th1/Th2 平衡向 Th2 偏移 , 而 Th1/Th2 偏移又 会促进肿瘤的发展 , 故探讨 Th1/Th2 功能状况以判断 肿瘤患者的免疫状态可为肿瘤生物治疗提供有效的 理论依据。 CD4+CD25+ 调节性 T 细胞 调节性 T 细胞具有免疫抑制功能，在多种 免疫性疾病中起重要的调节作用，成为近年 来免疫学领域研究的重要内容。 许多研究表明：在实体肿瘤和血液恶性肿瘤患 者中 Treg 数目增多。 在乳腺癌、卵巢癌、肺癌以及肝癌等多种实体 肿瘤患者外周血和肿瘤局部微环境中 ,Treg 比例增高 , 且数目与患者肿瘤进展程度和预后、生存率呈负相 关。 血液恶性肿瘤患者中 Treg 数目呈肿瘤发展阶段 相关性增长。但是 ,Treg 增高的机制尚不清楚。 去除 Treg 或封闭其抑制功能，可以增强抗肿瘤 免疫反应。 化疗作为一种重要的治疗肿瘤的方法 , 对肿瘤患