基因工程的基本操作程序(上课)PPT参考幻灯片.pptVIP

将目的基因导入受体细胞（植物细胞） 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 * 将目的基因导入受体细胞（动物细胞） 显微注射法 1.提纯 2.取卵 3.注射 4.移植 * 将目的基因导入受体细胞（微生物细胞） Ca2+处理 感受态大肠杆菌细胞 * 目的基因的检测与鉴定 检测: 是否插入目的基因 是否转录 是否翻译 鉴定: 功能活性鉴定 抗性鉴定 分别提取什么进行检测 归纳步骤 * 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法、基因枪法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 * 基因操作的基本步骤 * * 思考：1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？ 不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是： （1） 生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达； （2） 通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录； * （3） 目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记； （4） 为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等