演示课件小鼠脑组织病理总结.pptVIP

组化实验设计 1.对常规组织切片进行仔细观察,根据可提供形态学特点,选择最佳并能反映病变的组织标本 2.列出免疫组化的指标 3.进行预实验(设立阳性、阴性对照) 4.找出抗体的最佳修复方法、稀释度、孵育温度及孵育时间 5.每张切片应表明抗体名称,防止相互混淆 优选 * 优选 * 实验过程 —70°考片一夜 —二甲苯3个每个10分钟无水乙醇，95%，90%，85%，80%每个10分钟 —3%双氧水阻断室温10分钟（现配现用） —抗体修复液（现配，400ml一次一个抗体盒） 微波炉高火6-7分 —冷却至室温 —再修复一次冷却 —PBS5分×3 —擦片加一抗，4°过夜 优选 * —第二日PBS5分×3 —加二抗 室温20分 —PBS5分×3 —DAB显色 —水冲5-10分 —苏木素1-3分 —水冲10-15分 —80%85%90%每个3分 —95%（2个）无水乙醇（2个）二甲苯（2个）每个5分 —中性树胶封片。 优选 * 免疫荧光 —PBS5分×3 —5%BSA室温封闭1小时 —加一抗，4°过夜或根据说明书时间 —第二日PBS5分×3 —加二抗37°孵育1小时 —PBS5分×3 —DAPI染色 —PBS2分 —丙三醇封片荧光显微镜下观察照相。 优选 * 优选 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件