检测细胞中的DNA和RNAPDF打印版.pdfVIP

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学 海 无 涯 检测细胞中的DNA 和RNA 一、学习任务分析 《检测细胞中的DNA 与RNA》是浙科版必修1 第一章第三节中的建议活动,在实验的操 作上看,本活动可以锻炼学生使用显微镜的高倍物镜的能力。同时,本活动能使学生增加对 核酸的种类和性质的认识,为以后相关内容的学习打下基础。本活动将科学知识同实际操作 相结合,突出了所学内容一定程度的实用应用性。 二、学习者分析 本活动的授课对象是高二年级的学生。从知识起点上来看,学生通过上节课的学习已经 知道了一定程度的关于核酸的知识,他们自然会对“检测细胞中的DNA 与RNA”的方法、过 程以及原理产生兴趣,这正是促成学生进行本节活动的兴奋点。此外,学生通过初中实验已 掌握了显微镜的运用方法,这为本活动的开展奠定了知识基础。而从认知思维起点上看,高 二学生的思维方式已经开始从具象思维转向抽象思维,具备了一定的理论分析能力和逻辑思 维能力。所以本活动应注重学生与教师的双向交流,引导学生积极思考,锻炼他们获取信息、 从现象发掘本质、建构知识体系的能力。 三、教学重难点 1、教学重点:实验原理、显微镜的使用 2、教学难点:甲基绿使DNA 呈绿色,派洛宁使RNA 呈红色。 四、教学目标 1、知识与技能目标: (1)能够分析说明DNA 和RNA 在结构上的不同点 (2)熟悉显微镜的使用方法 2、过程与方法目标: (1)掌握制作装片的方法 (2)能够使用试剂对材料进行染色 3、情感态度和价值观目标: 在动手能力方面上得到培养,在学习态度上得以提升而变得更加积极、乐观。 五、教学过程 1、实验原理分析 (1)真核细胞的DNA 主要分布在细胞核内,RNA 主要分布在细胞质中。 (2)甲基绿和派洛宁两种染色剂对DNA 和RNA 的亲和力不同,甲基绿对DNA 亲和力强,使DNA 显现出绿色,而派洛宁对RNA 的亲和力强,使RNA 呈现出红色。用甲基绿、派洛宁的混合染 色剂将细胞染色,可同时显示DNA 和RNA 在细胞中的分布。 (3)盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; 盐酸使染色体中的DNA 与蛋白质分离,便于DNA 与染色剂的结合。 2、实验材料用具 (1)材料:新鲜动物(蛙)肝脏。 (2)用具:恒温水浴,100mL 的烧杯,1000mL 烧杯,量筒,滴管,天平,载玻片,盖玻片, 吸水纸,显微镜。 (3)试剂及配制方法 试剂:1mol/L 的盐酸,蒸馏水(盛于滴瓶内),派洛宁甲基绿混装粉,乙酸钠,乙酸。 如果实验室没有派洛宁甲基绿混装粉,可以分别用甲基绿和派洛宁G,然后按染色剂A 液配 1 学 海 无 涯 制中的方法2 进行配制。 染色剂的配制 ⅰ染色剂A 液的两种配制方法 方法1:取派洛宁甲基绿粉1g,加入到100mL 蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液 放入棕色瓶中备用。 方法2:取甲基绿2g 溶于98mL 蒸馏水中,取派洛宁G 5g 溶于95mL 蒸馏水中。取6mL 甲基绿溶液和2mL 派洛宁溶液加入到16mL 蒸馏水中,即为A 液,放入棕色瓶中备用。 ⅱ染色剂B 液的配制方法:B 液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠 16.4g,用蒸馏水溶解至1000mL 备用;再取乙酸12mL,用蒸馏水稀释至1000mL 备用。取配 好的乙酸钠溶液30mL 和稀释的乙酸20mL,加蒸馏水50mL,配成pH 为4.8 的B 液(缓冲液)。 ⅲ染色剂的配制染色剂是由A 液和B 液混合配制而成的。取A 液20mL 和B 液80mL 混合, 就是实验中所用的甲基绿-派洛宁染液。应该注意的是该试剂应现用现配。 3、实验步骤 (1)涂片 取新鲜的动物肝脏切开,将其断面在一干净的载玻片中央涂抹数下,晾干。 (2)水解 将盛有 60mL 1mol/L 盐酸溶液的小烧杯,置于 30℃的恒温水浴中。将晾干的载玻片倾斜 着浸没于30℃的盐酸溶液中水解10min (温度适中控制在30℃±1℃)。 (3)漂洗 用镊子取出涂血的载玻片,用滴管向稍微倾斜的载玻片上加水,让水从一端缓慢流过血膜, 这样反复冲洗2-3 次。 (4)染色 用吸水纸吸去血膜周围的水分,再将载玻片放入盛有60mL 甲基

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