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骨髓检验 主要内容 骨髓细胞学检查 细胞形态学 细胞化学染色 免疫表型分析 染色体分析 基因诊断 骨髓病理学检查 组织结构 免疫组织化学染色 骨髓检查流程 1.骨髓检查适应证 造血系统疾病 某些血液病及其相关疾病 某些寄生虫感染性疾病 恶性肿瘤骨髓转移 某些类脂质沉积病 待查 贫血原因待查 发热原因待查 淋巴结肿大原因待查 肝脾肿大原因待查 骨痛原因待查 2.标本制备 取材部位:髂后、髂前上棘、胸骨、棘突、病灶部位 采集、涂片 染色:瑞氏(Wright)染色或瑞-姬(Giemsa)混合染色 Bone Marrow Aspirate 3.镜检 低倍镜 制片质量 增生程度(5级) 巨核细胞计数 异常细胞筛查 选择油镜检查区域 油镜 有无造血岛 细胞形态观察 有核细胞分类计数 计算粒红比值 有无异常细胞及寄生虫 4.分析 要结合外周血象来分析 对疑难细胞或不典型标本的处理 借助其他方法:化学染色、免疫表型分析 两个阶段间的细胞,计入下一阶段 换部位重抽或定期复查 形成骨髓象检查报告 描写细胞形态与数量,作出肯定性诊断、支持性诊断、排除性诊断或形态学描写。 注意事项 骨髓片应制作良好,才能进行形态学观察 正常骨髓象 有核细胞增生活跃 粒红比值为2~4:1,平均3:1 各系细胞比例、形态、染色大致正常 巨核细胞7~35个/1.5x3cm2,多为产板型 可见少量单核细胞、浆细胞、骨髓基质细胞、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞等 核分裂细胞约为0.1% 骨髓有核细胞增生程度 各系细胞 粒系细胞:原粒、早幼粒、中性幼粒、中性杆状核、中性分叶核、嗜酸性、嗜碱性粒细胞 红系细胞:原红、早幼红、中幼红、晚幼红 淋巴细胞:成熟、原淋、幼淋 巨核系细胞:原始、幼稚、颗粒型、产板型 少量单核细胞、浆细胞、骨髓基质细胞(成纤维细胞、内皮细胞、脂肪细胞、巨噬细胞等)、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞 细胞化学染色(cytochemical stain) 髓过氧化物酶(POX)染色 酯酶(esterase)染色 中性粒细胞碱性磷酸酶(ALP)染色 糖原(PAS)染色 铁染色 一些名词缩写介绍 AML:急性髓系白血病 AML-md:微分化型(AML-M0) AML-wom:未成熟型(AML-M1) AML-wm:成熟型(AML-M2) AMML:急性粒-单核细胞白血病(AML-M4) AMoL:急性原单核细胞和单核细胞白血病(AML-M5) AEL:急性红白血病(AML-M6) AMegL:急性巨核细胞白血病(AML-M7) 一些名词缩写介绍 ALL:急性淋巴细胞白血病 APL:急性早幼粒细胞白血病 CML:慢性髓性白血病 CLL:慢性淋巴细胞白血病 AA:再生障碍性贫血 PNH:阵发性睡眠性血红蛋白尿 MDS:骨髓增生异常综合征 IDA:缺铁性贫血 RARS:难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多 POX染色 正常细胞染色反应(-~++++) 存在于髓系细胞胞质中,愈成熟反应愈强,原粒C(-)。 原单C(-),幼单C和单核C(±)。 淋巴、巨核、幼红细胞(-) 临床意义 AML-md(-) AML-wom(-) AML-wm(+++) AMML(+) AMoL(-/±) AMegL(-) ALL(-) 酯酶染色 三种酯酶 特异性酯酶(SE) 非特异性酯酶(NSE) 单核细胞酯酶(ME) 用于鉴别诊断AML亚型 酯酶染色(正常细胞反应) 酯酶染色(临床意义) ALP染色 正常中性粒细胞染色反应(-~++++) 10%~40%(+) 积分7~51 临床意义 鉴别感染性疾病的类型(细菌感染时酶活性增强) 鉴别CML和类白 鉴别AA和PNH 鉴别真性红细胞增多症和继发性红细胞增多症 PAS染色 正常细胞染色反应 粒系细胞:中幼粒以下阶段(+~+++);巨核系和PLT:(+++) 淋巴、单核:( ±) 幼红C、RBC:(-) 临床意义 ALL、淋巴瘤细胞白血病:(+++,粗颗粒或块状); AML-wom:(-);AMML:(+,弥漫,细颗粒) CLL:(+,粗颗粒) 幼红细胞克隆增生:(+,粗颗粒或块状); 幼红细胞良性增生:(-) 铁染色 正常染色反应(-~++++) 细胞外铁:+~++ 铁粒幼细胞:19%~44%,无环形铁粒幼细胞 临床意义 鉴别IDA与非IDA 诊断铁粒幼细胞性贫血 诊断MDS-RARS 几种常见AL的细胞化学染色结果 细胞免疫表型(immunophenotypes)分析 标本:血液、骨髓、淋巴结穿刺液、胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液 临床意义 急性白血病和淋巴瘤的分型诊断与疗效、预后判断 成熟淋巴细胞肿瘤的分类诊断 淋巴细胞免疫表型分析判断免疫功能 造血干细胞计数 方法 流式细胞仪:目前的首选方法 免疫组织化学法:用于病理切片 免疫
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