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紫外分光光度法测定维生素A含量
维生素A(vitaminA)又称 视黄醇(其醛衍生物视黄醛)是一个具有酯环的不饱和一元醇,包括维生素A 1、A2 两种。维生素A1 和A2 结构相似)
1.原理 维生素A的异丙醇溶液在325nm波长下有最大吸收峰,吸光度与维生素A的含量成正比。
2.试剂(1)维生素A标准溶液:同比色法试剂
(2)异丙醇。
3.仪器
紫外分光光度计。
4.操作方法
(1)样品处理
按照三氯化锑比色法进行。
(2)标准曲线绘制
分别取维生素A标准溶液(每毫升含10 I.U) 0.0ml,1.0ml,2.0ml,3.0ml,4.0ml,5.0ml,于10ml棕色容量瓶中,用异丙醇定容。以空白液调仪器零点,于紫外分光光度计上在325nm波长下分别测定吸光度,绘制标准曲线。
(3)样品经皂化、提取、洗涤、浓缩后,迅速用异丙醇溶解并移入50ml容量瓶中,用异丙醇定容,于紫外分光光度计325nm处测定其吸光度,从标准曲线上查出相当的维生素A含量。
5.计算
维生素A(I.U/100g)=a*V/m*100
式中 a——由标准曲线查得维生素A含量(I.U/ml)
V——样品的异丙醇溶液体积(ml)
m——样品质量(g)。
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