实时荧光基因相对表达数据处理△△CT(汇编).pdfVIP

精品文档 实 时荧光定量 PCR（Quantitative Real-time PCR ）数据处理 相对定量△ CT 和 2- △△ CT方法 一、实时荧光原理及其中的概念 实时荧光定量 PCR （Quantitative Real-time PCR）作为分子生物学实验中强 大快速的一种检测手段，已经被广泛应用于临床和普通实验室。废话不多说，简 单介绍一下其原理，和两个基本概念 Ct （Cycle threshold ）和扩增效率 ，然后详 细解释一下相对基因定量的方法。 实时定量 PCR技术 ：利用荧光信号的变化实时检测 PCR扩增反应中每一个循 环扩增产物量的变化，通过 Ct 值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析。 qPCR中常用的荧光染料为 SYBR Green I，加入过量 SYBR荧光染料， SYBR荧光染 料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的 SYBR染料分子不 会发射任何荧光信号，因此在