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张 海 龙
山东教育学院 生物系
Shan Dong Institute of Education;主要内容:;一种是使底物在酶(游离酶或固定化酶)的作用下进行反应,如淀粉的液化、异构糖的生产、无侧链青霉素(6-APA)的制造等。
另一种是通过细胞的培养,利用细胞中的酶系,把培养基中的物质通过复杂的生物反应转化成新的细胞及其代谢产物。 ;第一节、生物反应过程动力学描述;菌体生长速率
比生长速率; 微生物细胞比生长速率和倍增时间因受遗传特性和生长条件的控制,有很大的差异。;;;二、基质消耗速率;当基质既是能???又是碳源时:
碳源总消耗速率=用于生长的消耗速率+用于维持代谢的消耗速率;定义:消耗单位基质量ΔS(每克或每摩尔)与生成的干菌体ΔX(g)之间的比值定义为菌体得率(YX/S)。[消耗1g基质生成细胞的克数]
通常,菌体X以干重表示;基质S是培养液中某一限制性底物。;;三、代谢产物的生成速率;基质的消耗比速:;第二节、生物反应模式与发酵方法;(1)类型Ⅰ(偶联型模型)
产物的形成与细胞生长呈相关的过程。产物是细胞能量代谢的结果,此时产物通常是基质的分解代谢产物。例如乙醇、乳酸发酵。
其动力学方程可表示为: ; (2)类型Ⅲ(非偶联型)
产物的形成与细胞生长不相关或无直接关系,其特点是细胞生长期基本无产物合成,细胞停止生长产物则大量合成。属于这类的产物是次级代谢产物。例如青霉素、链霉素等抗生素发酵。
其动力学方程可表示为:; (3)类型Ⅱ(混合型)
产物的形成与细胞生长部分相关或具有间接关系,例如柠檬酸、谷氨酸发酵等。
其动力学方程可表示为:;定义:生成的代谢产物量ΔP对底物的消耗量ΔS(g)之比定义为代谢产物收率(YP/S)。
假如完全没有菌体生成,则理论代谢产物收率可达到最大值。;;二、发酵操作方法 ;(二)、补料分批发酵法;补料分批培养适合于以下条件;补料分批培养的优点;(三)、连续发酵法;连续发酵优点:;;连续发酵类型 ;单罐均匀混合连续发酵;管道非均匀混合连续发酵;塔式非均匀混合连续发酵;第三节、微生物发酵动力学;一、 微生物分批发酵动力学; (1) 停滞期; (2)对数生长期;微生物的最大比生长速率在工业上的意义; (3)稳定期; (4)死亡期;;Monod方程
的物理意义
当比生长速率为最大比生长速率一半时的限制性营养物质浓度,它的大小表示了微生物对营养物质的吸引亲和力大小。; KS越大,表示微生物对营养物质的吸引亲和力越小,反之越大。对于许多微生物来说,KS值是很小的,一般为0.1~120mg/l或0.01~3.0mmol/l,这表示微生物对营养物质有较高的吸收亲和力。;微生物比生长速率与底物之间有一定的关系;Monod方程的参数求解(双倒数法):;例:在一定条件下培养大肠杆菌,得如下数据:;μmax,=1.11 (h-1);
Ks=97.6 mg/L;3、分批培养时基质的消耗速率;4、分批培养时产物的形成速率;产物形成与细胞生长的关系;5、分批发酵过程的生产率;发酵总时间为: ; 通过方程可以估算发酵过程中各种因素的变化对平均生产率的影响。接种量大,X0大,发酵时间短,减少tc和tf,也能缩短发酵周期。对于短发酵周期(18~70h)而言,如谷氨酸发酵,tc和tf非常重要,而对长发酵周期(3d以上),如抗生素生产,tc和tf就不太重要了。迄今为止,分批培养是常用的培养方法,广泛用于各种发酵过程。 ;二、补料分批发酵动力学;2、补料分批培养的动力学;(2)、重复补料分批培养;三、连续发酵动力学;细胞的物料平衡
流入的细胞-流出的细胞+生长的细胞-死去的细胞=积累的细胞
即:;在一定范围内,人为调节培养基的流加速率,可以使细胞按所希望的比生长速率来生长。;第四节、微生物生长代谢过程中的质量平衡;;;;;思考题?;End
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