基因工程的基本操作程序73594.pptVIP

* 一.2 基因工程的基本操作程序 善假于物也 提取目的基因， 目的基因与运载体结合， 将目的基因导入受体细胞， 目的基因的表达和检测 一、 获取目的基因的方法： 1、从基因文库中获取目的基因 2、利用PCR技术扩增目的基因 概念：基因文库 （gene library） 基因组文库 部分基因文库（如cDNA文库） 基因组文库 cDNA文库 基因组文库与部分基因文库的关系 寻根问底—— （1）为什么要构建基因文库？直接从含有目的基因的生物体内提取不行吗？ 提示：构建基因文库是获取目的基因的方法之一，并不是惟一的方式。如果所需要的目的基因序列已知，就可以通过PCR方式从含有该基因的生物的DNA中，直接获得，也可以通过反转录，用PCR方式从mRNA中获得，不一定要构建基因文库。但如果所需要的目的基因的序列完全不知，或只知道目的基因序列的一段，或想从一种生物体内获得许多基因，或者想知道这种生物与另一种生物之间有多少基因不同，或者想知道一种生物在个体发育的不同阶段表达的基因有什么不同，或者想得到一种生物的全基因组序列，往往就需要构建基因文库。 （2）基因文库如何构建？ 将某种生物体内的DNA全部提取出来，选用适当的限制酶， 将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后，将这些DNA 片段分别与载体连接起来，导入受体菌的群体中储存，每个 受体菌都含有了一段不同的