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- 2020-08-03 发布于天津
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酶的催化机制;酶催化机理研究的主要方法;(2)三维结构的研究
酶的三维结构决定了酶的功能,如果得到酶的三维
结构信息,对酶的催化机制的研究提供最直接的线索
。获得酶三维结构的方法有X射线衍射和NMR。
(3)定点突变
分子生物学技术的发展使对蛋白质定点突变变的很
容易,所以只要得到一个酶的基因,就可以对其氨基
酸序列进行任意的突变。如果对一个酶氨基酸残基进
行有的放矢的突变,会对酶的作用机制研究提供有价
值的信息。把胰蛋白酶活性中心裂缝底部的Asp189突
变成不带电荷或带正电荷的氨基酸残基,胰蛋白酶活
性完全丧失。胰蛋白酶只水解碱性氨基酸残基与其他
氨基酸氨基形成肽键,所以Asp189通过侧链的负电荷
与底物上的碱性氨基酸残基带正电荷的侧链结合。;过渡态稳定学说; ΔG活为反应活化能HA-HB-HC为过渡态中间物。过渡态中间物既不是产物,也不是底物,而是介于旧化学键减弱,新化学键开始形成的一种不稳定的结构状态。活化能也不是反应的总自由能变,自由能变与反应平衡时底物浓度和产物浓度有关,而活化能与反应速度有关。活化能越低含有足够能量的反应物分子越多,反应发生的越快。提高温度或其他因素的作用可以促进更多的反应物达到过渡态,提高反应速度。所有的催化剂都是通过降低活化能加快反应速率。;;酶促反应和非酶促反应过程的自由能变化;过渡态稳定的化学机制;邻近定向效应;广义的酸碱催
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