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.. . . .. CIK 细胞制备标准操作程序 1 目的和范围： 1.1 目的：规范 CIK 细胞培养过程，保证操作准确，避免人为 操作误差导致实验效果不良或失败。 1.2 范围：该规程适用于实验室细胞培养技术人员 CIK 细胞培 养操作的全过程。 2 原理： 2.1 外周血单核细胞经细胞刺激因子诱导后分分化为 CIK 细胞。 3 相关文件： 3.1 4 物料： 4.1 试剂：75%酒精，碘伏，生理盐水，淋巴细胞分离液 （Ficoll ）， GT-T551 培养基 ,CIK 条件培养基 1、CIK 条件培养基 2 。 4.2 仪器设备：生物安全柜，离心机，水浴锅，二氧化碳细胞 培养箱，电动移液枪， 10ul 移液枪， 200ul 移液枪，医用剪 刀，医用止血钳，试管架。 2 4.3 耗材： T175 透气培养瓶（ 175cmFlask ），T75 透气培养瓶 2 （75cm Flask ），CO透气培养袋， 15ml 离心管， 50ml 离心管， 2 学习参考 崇州医院治疗中心 标准操作程序 5ml 移液管， 10ml 移液管， 50ml 一次性注射器 ,5ml 一次性注 射器， 200ul 枪头。 5 记录 5.1 DC-CIK 细胞制备记录。 6 职责： 6.1 细胞培养技术人员应严格按照本规程的规定进行 CIK 细胞 培养操作。 6.2 QA负责监督细胞培养技术人员的操作全过程，确保 CIK 细 胞培养操作的规范性。 6.3 审核人负责保证本规程的审核和全过程准确有效。 7 工作程序： 7.1 实验前准备： 7.1.1 洁净区及工作台紫外照射≥ 30min ，风机开启 30 分钟。 7.1.2 物料准备： 将已灭菌且在有效期内器械放于物料传递 窗进行紫外照射，≥ 30min 后，去包布，经酒精擦拭后 放入生物安全柜中备用。 7.1.3 单核细胞分离液（ Ficoll ）提前 30min 从 4 ℃冰箱取 出待用。 7.1.4 单核细胞分离液 （Ficoll ），GT-T551 培养基， 血清， CIK 细胞制备 SOP-TC-001 第 2 页 共 12 页 .. . . .. 在实验前需提前准备好放入生物安全柜中，以便其恢复 常温，否则将会影响实验效果。 7.2 分离 7.2.1 制备血浆： 7.2.1.1