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高中生物必修二 DNA的复制 北京市第九十四中学 张雪 DNA复制过程 细菌DNA复制 “θ”型复制 环状DNA的复制方式，即从复制起点开始，双向同时进行，形成θ样中间物 环节： DNA复制的起始 DNA链的延伸 DNA复制的终止 1、DNA复制起点双链解开 ，形成复制叉 2、RNA引物的合成 3、DNA聚合酶将第一个dNTP加到引物的3-OH末端 复制的起始 DNA复制延伸 （二）DNA聚合反应的特征 1、DNA的聚合反应是以dNTP为底物，以3’ →5 ’ DNA为模板，按碱基配对原则在3’-OH上加dNTP （DNA聚合酶对碱基的选择功能） 2、链沿5’ 3’方向延长 3、碱基互补配对，若错配则切除掉 （一）DNA复制体(replisome) DNA聚合酶Ⅲ全酶分子、引发体和解旋酶构成的复合体 （三）防止拓扑学问题两种机制 DNA在生物细胞中本身就是负超螺旋，当DNA解链而产生正超螺旋时，可以被原来存在的负超螺旋所中和 nick 结合Pol I 引物移动 / DNA合成 封闭缺口 降解的引物 DNA ligase （四）缺刻平移( Nick translation)去除引物 5′ 5′ 3′ 3′ parent progeny AATTAGTATGTTGTAACTAAAGT TTAATCATACAACATTGATTTCA terD / terA terC / terB Replication fork 1 Replication fork 2 tus gene 产物 复制终止区： 200 kb （DnaB inhibitor) 复制叉相遇位点 三、细菌DNA复制的终止 Topoisomerase IV：使复制叉解体，释放子链DNA （三）分离（segregation） （一）终止位点 一侧复制叉的终止位点位于相遇点的另一侧 （二）终止机制 1、Tus蛋白的作用： 可与终止序列结合，阻止复制叉继续前移 2、两个复制叉在相遇点相遇 3、两个复制叉在复制快的复制叉的终止点相遇 线状DNA末端复制的过程如何？ 思考 线状DNA末端复制问题 1、复制后产生粘性末端（sticky end）：滞后 链的5’端引物切除后，因没有3’-OH存在 DNA聚合酶无法将缺少的部分补齐 2、染色体不稳定 3、染色体末端隐缩：DNA每复制一次，DNA 就缩短一次 讨论：环状DNA是否存在末端复制问题？ 二、T7 噬菌体DNA的末端复制 真核生物如何解决末端复制的问题? 三、真核生物染色体 DNA末端复制 （一）端粒（Telomere） 1、概念：是真核生物染色体末端的一种特殊结构 2、组成：端粒DNA / 端粒蛋白 （1）端粒蛋白 ：非组蛋白 （2）端粒DNA ： a、含数百个短的正向重复序列，富含GC b、通式：Cn（A/T）m n1，m=1-4 人的端粒DNA序列：（TTAGGG）n 3、作用 （1）稳定染色体结构 （2）防止染色体末端融合 （3）保护染色体结构基因 （4）避免遗传信息在复制过程中丢失 附：端粒长度----分子钟(molecularclock) 的作用 随着细胞不断分裂，端粒的长度越来越短，当 达到一个临界长度，细胞染色体即失去稳定性， 阻止细胞进一步分裂的信号便发出。细胞将发 生凋亡（apoptosis） （二）端粒酶 1、组成 （1）蛋白质：逆转录酶 （2）RNA：约150nt，部分序列与端粒DNA互补， 可作为合成端粒DNA的模板 （端粒酶是自身携带RNA模板的逆转录酶） 2、功能：负责端粒DNA的延长，维持端粒的长度 3、存在部位： 在干细胞、生殖细胞和肿瘤细胞， 才可以检测到具有活性的端粒酶 4、端粒酶和衰老、肿瘤有关 （三）端粒DNA的复制 1、已存在的端粒DNA的复制： 与其它部分DNA复制一起完成 2、端粒DNA的延长 主要由端粒酶完成 （1）G链（G-rich strand）的合成 （2）C链（C-rich strand）的合成 G链的合成 [1] 端粒酶与端粒DNA结合，端粒中的RNA与凸出的 G链3