核酸杂交定义.pptVIP

  • 38
  • 0
  • 约小于1千字
  • 约 22页
  • 2020-08-06 发布于福建
  • 举报
Southern Blot 核酸杂交的定义 杂交( Hybridization):如果把不同的DNA链放 在同一溶液中做变性处理,或把单链DNA与RNA放 在一起,只要有某些区域(当然也可以是链的大 部分)有成立碱基的可能,它们之间就可形成局 部的双链,这一过程称为核酸杂交。 ● Southern blot:检测DNA ● Northern Blot:检测RNA Southern Blot的原理 ●DNA经过标准琼脂糖电泳按分子大小分离,再 经原位变性,从胶上转到固相支持物上。附于膜 上的DNA可以与标记的DNA,RNA或寡核苷酸 探针杂交,通过特定的检测方法如放射自显影可 以确定与探针互补的条带位置。 尼龙膜(阳性电荷):400-500ug核酸/cm2 变性转移液:0.4moL/ L Naoh、1mol/ L NaCl 水相缓冲液杂交溶液:6*SSC 预杂交液: 6×SSC(或6×SSPE) 5× Denhardt试剂 0. 5% SDS lug/ml poly a l00μg/ml经变性并断裂成片段的鲑精DNA 探针 Southern Blot操作流程 1、将DNA转移至尼龙膜; 2、尼龙膜洗涤、固定; 3、与探针杂交; 4、成像或显色。

文档评论(0)

1亿VIP精品文档

相关文档