薄层色谱检查法标准操作规程.pdf

精品文档 文件名称 薄层色谱检查法标准操作规程 文件编号 SOP-QC-01002 版本状态 00 页数 4 页 起 草 人 起草日期 年 月 日 审 核 人 审核日期 年 月 日 批 准 人 批准日期 年 月 日 颁发部门 质量部 生效日期 年 月 日 分发单位 质量部、质量控制室 目的：规范薄层色谱法检验操作规程，保证检验的质量 。 范围： 适用于本厂用薄层色谱法检查的物料及产品。 责任： 质量控制室人员。 内容： 1 薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所 含成分分离，所得色谱图与适宜的对照物按同法所得的色谱图对比，并可用薄层扫描仪进行 扫描，用于鉴别、检查或含量测定。 2 仪器与材料 2.1 薄层板：按支持物的材质分为玻璃板、塑料板或铝板等；按固定相种类分为硅胶薄 层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。固定相中可加入 黏合剂、荧光剂。硅胶薄层板常用的有硅胶 G、硅胶 GF254、硅胶 H、硅胶 HF254、G、H表示 含或不含石膏黏合剂。 F254为在紫外光 254nm波长下显绿色背景的荧光剂。按固定相粒径大 小分为普通薄层板 10～40 μm和髙效薄层板 5-10 μm 保证色谱质量的前提下，可对薄层板进行特别处理和化学改性以适应分离的要求，可用 实验室自制的薄层板。固定相颗粒大小一般要求粒径为 10? 40pm。玻板应光滑、平整，洗 净后不附水珠。 2.2 点样器：一般采用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材。 2.3 展开容器：上行展开一般可用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸，展开时须 能密闭。水平展开用专用的水平展开缸。 2.4 显色装置：喷雾显色应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器，要求用压缩气体使显色剂呈 均匀细雾状喷出；浸溃显色可用专用玻璃器械或用适宜的展开缸代用；蒸气熏蒸显色可用双 槽展开缸或适宜大小的干燥器代替。 2.5 检视装置：为装有可见光、 254nm及 365nm紫外光光源及相应的滤光片的暗箱，可附 加摄像设备供拍摄图像用，暗箱内光源应有足够的光照度。 2.6 薄层色谱扫描仪：系指用一定波长的光对薄层板上有吸收的斑点，或经激发后能发 射出荧光的斑点， 进行扫描， 将扫描得到的谱图和积分数据用于物质定性或定量的分析仪器。 3 操作方法 。 精品文档 3.1 薄层板制备 3.1.1 市售薄层板：临用前一般应在 110℃活化 30 分钟。聚酰胺薄膜不需活化。铝基片 薄层板可根据需要剪裁，但须注意剪裁后的薄层板底边的硅胶层不得有破损。如在存放期间 被空气中杂质污染， 使用前可用三氯甲烷、 甲醇或二者的混合溶剂在展开缸中上行展开预洗， 110℃活化，置干燥器中备用。 3.1.2 自制薄层板：除另有规定外，将 1 份固定相和 3 份水（或加有黏合剂的水溶液） 在研钵中按同一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂 布器进行涂布（厚度为 0.2 ～0.3mm），取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干后， 在 110℃烘 30 分钟，即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度，在反射光及透视 光下检视，表面应均匀、平整、光滑，无麻点、无气泡、无破损及污染。 3.2 点样：除另有规定外，在沽净干燥的环境，用专用毛