鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定.docxVIP

________________________________ [基金项目]广东省医学实验动物中心科研项目（2012001），发明专利号：201210007089.5 [作者简介]任海涛（1984- ），男，研究实习员，从事实验动物和比较医学研究工作。E-mail: maxren@163.com [通讯作者]唐小江（1967- ），男，主任医师，从事实验动物和比较医学研究工作。*E-mail: river-t@126.com 鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定 任海涛 钟志勇 郑佳琳 饶子亮 邝少松 王刚 唐小江* （广东省医学实验动物中心，佛山 528248） 【摘　要】　目的 建立一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原蛋白的方法。方法 通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱，用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、醋酸溶液复溶进行鼠尾胶原蛋白的纯化。超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定。结果 本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白，纯度达到电泳纯。与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响，建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件，胃蛋白酶用量：1:500，酶解时间：72h，盐析浓度：2mol/L，提取所