蛋白质翻译生物化学课件ppt3教学幻灯片.ppt

Department of Biochemistry 二、真核生物的肽链合成过程（一）起始 核蛋白体大小亚基分离； 起始氨基酰-tRNA与小亚基结合； mRNA在核蛋白体小亚基就位； 核蛋白体大亚基结合。 真核生物中（eukaryote）的mRNA具有帽子结构，需特殊的帽子结合蛋白（CBP）复合物以识别此结构。 Met 40S 60S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ Met Met-tRNAiMet-elF-2 -GTP 真核生物翻译起始复合物形成过程 原核生物 　真核生物 核蛋白体 　　70s 80s S-D序列 　　有 无 5’-帽结构 　　无 有 起始因子 　　少 多 起始复合物形成 mRNA先于 甲酰甲硫氨酰- tRNA结合于 小亚基 甲硫氨酰-tRNA先结合小亚基，然后mRNA借助CBP及其它起始因子结合于小亚基 原核生物和真核生物的翻译起始复合物生成比较 （二）延长 真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。 真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 （三）终止 真核生物翻译终止过程与原核生物相似，但只有1个释放因子eRF，可识别所有终止密码子，完成原核生物各类RF的功能。 原核生物与真核生物肽链合成过程的主要差别 原核生物 真核生物 mRNA 一条mRNA编码几种蛋白质（多顺反子） 一条mRNA编码一种蛋白质（单顺反子） 转录后很少加工 转录后进行首尾修饰及剪接 转录、翻译和mRNA的降解可同时发生 mRNA在核内合成，加工后进入胞液，再作为模板指导翻译 核蛋白体 30S小亚基＋50S大亚基 ? 70S核蛋白体 40S小亚基＋60S大亚基 ? 80S核蛋白体 起始阶段 起始氨基酰-tRNA为fMet-tRNAfMet 起始氨基酰-tRNA为Met-tRNAiMet 核蛋白体小亚基先与mRNA结合,再与fMet-tRNAfMet结合 核蛋白体小亚基先与Met-tRNAiMet结合，再与mRNA结合 mRNA中的S-D序列与16S rRNA 3?-端的一段序列结合 mRNA中的帽子结构与帽子结合蛋白复合物结合 有3种IF参与起始复合物的形成 有至少10种eIF参与起始复合物的形成 延长阶段 延长因子为EF-Tu、EF-Ts和EF-G 延长因子为eEF-1α、eEF-1βγ和eEF-2 终止阶段 释放因子为RF-1、RF-2和RF-3 释放因子为eRF 第四节 蛋白质翻译后修饰和输送 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 这一加工过程称为翻译后修饰(posttranslational modification) 蛋白质合成后被定向输送到其发挥作用的靶位点的过程称为蛋白质的靶向输送(protein targeting)。 一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、模序、结构域到形成完整空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成，而需要其他酶、蛋白辅助。 1、分子伴侣 (molecular chaperon) 分子伴侣是细胞一类保守蛋白质，可识别肽链的非天然构象，促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。 主要功能有： ①封闭待折叠蛋白质的暴露的疏水区段； ②创建一个隔离的环境，可以使蛋白质的折叠互不干扰； ③促进蛋白质折叠和去聚集； ④遇到应激刺激，使已折叠的蛋白质去折叠。 分子伴侣主要有： 热休克蛋白、伴侣蛋白、触发因子等 （1） 热休克蛋白(heat shock protein, HSP) 热休克蛋白属于应激反应性蛋白质，高温应激可诱导该蛋白质合成。热休克蛋白可促进需要折叠的多肽折叠为有天然空间构象的蛋白质。 热休克蛋白包括HSP70、HSP40和GrpE三族。 它有两个主要功能域：一个是存在于N-端的高度保守的ATP酶结构域，能结合和水解ATP；另一个是存在于C-端的多肽链结合结构域。蛋白质的折叠需要这两个结构域的相互作用。 大肠杆菌的HSP70 (DnaK) ATP酶 肽链结合结构域 H2N EEVD-COOH Grp E 结合部位 DnaJ/HSP40 结合部位 大肠杆菌的HSP40 (Dna J)可激