辣椒对盐、碱胁迫差异响应的生理及转录组分析.pdf

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    摘要 全球土地有 23% 的盐土和37%的苏打土,且分布范围还在逐年扩大。新疆地处内陆,蒸发巨大, 有近 1/3 的土壤为盐碱土。一般认为盐土主要由中性盐如氯化钠等组成,而碱土主要由碳酸钠等组 成,pH 大于 9.0 。研究表明中性盐胁迫和碱性盐胁迫对植物的影响不同,植物对两种胁迫的适应策 略也不相同。为了明确中性盐、碱性盐对辣椒幼苗生长发育的影响差异,研究以辣椒为试材,在水 培条件下模拟土壤盐碱环境,分析了中性盐(NaCl ,pH7.05 )、碱性盐(Na CO :NaHCO =1:9 ,pH8.98 )、 2 3 3 混合盐(NaCl: Na CO :NaHCO =10:1:9 ,pH8.95 )胁迫下辣椒幼苗叶片渗透调节、抗氧化特性、氮 2 3 3 素代谢、转录表达的差异,以期从生理和转录水平阐明辣椒幼苗对中性盐、碱性盐胁迫的差异响应 机理,从而为辣椒在盐碱土的栽培提供参考。本研究具体结果如下: 1. 与对照相比,盐、碱及其混合胁迫的辣椒叶片脯氨酸均有升高,且中性盐胁迫的升高幅度 最大;碱性盐和混合胁迫的辣椒叶片可溶性糖含量较对照升高,中性盐胁迫下可溶性糖含量下降较 快,说明脯氨酸对中性盐胁迫下的辣椒幼苗渗透调节具有重要作用,而可溶性糖更倾向于调节碱性 盐胁迫。三种盐胁迫下辣椒幼苗均可通过上调表达 Δ1-吡咯琳-5 -羧酸合成酶基因(P5CS )和鸟氨 + + 酸-δ-氨基转移酶基因(δ-OAT )基因来增加脯氨酸和可溶性糖含量,同时诱导 Na /H 逆向转运蛋白 + + 基因(NHX )、Na /K 转运蛋白基因(HKT) 、柠檬酸合成酶基因(CS)的表达, 影响辣椒幼苗的渗透 调节能力;除此以外 CS 基因在中性盐胁迫 3 天后表达受到抑制,但在碱性盐胁迫中一直处于高表达 状态,说明辣椒叶片在碱性盐胁迫下通过大幅度上调表达 CS 而抵御高 pH 带来的伤害,从而揭示了 柠檬酸在辣椒抵御碱性盐胁迫的过程中有更重要的作用。 2. 通过盐、碱及其混合胁迫下对辣椒幼苗叶片抗坏血酸(ASC )和谷胱甘肽(GSH )含量、 抗氧化酶活性及相关基因表达量的测定,结果表明在试验胁迫条件下,辣椒幼苗首先通过细胞内稳定 存在的还原型抗坏血酸(ASC )和还原型谷胱甘肽(GSH )来清除过多的活性氧维持氧化还原平衡。 碱性盐胁迫下谷胱甘肽还原酶(GPX )活性及其基因表达量大于中性盐胁迫,说明碱性盐胁迫更加 趋向于通过增加谷胱甘肽库来平衡过多的活性氧,减轻氧化损伤。同时,抗氧化酶活性及其相关基 因表达量显示,三种胁迫均会抑制辣椒叶片氧化还原能力,但超氧化物歧化酶(SOD )、过氧化氢 酶(CAT )活性对中性盐胁迫表现出更迅速的响应,对碱性盐胁迫的响应主要发生在试验胁迫后期。 3. 对盐、碱及其混合胁迫下辣椒幼苗的氮素含量、氮代谢相关酶活性及基因表达量的分析发 现三种胁迫下辣椒叶片硝态氮含量均较对照显著降低,诱导辣椒叶片上调表达硝酸盐转运子 NRT2.5 以加快外部氮素的转运;三种胁迫下氨态氮含量随时间延长显著升高,在后期(胁迫9 天后)碱性 盐胁迫的辣椒叶片氨态氮含量显著高于中性盐胁迫。胁迫下辣椒叶片的硝酸还原酶(NR )、谷氨酰 胺合成酶(GS )、谷氨酸合成酶(GOGAT )的酶活性下降,其相应的基因表达量都下调。上述氮代 谢结果表明盐、碱及其混合胁迫时辣椒幼苗叶片的氮代谢途径受到抑制,同 Na+浓度下碱性盐胁迫 的破坏作用更强烈。 4. 对盐、碱胁迫 4h 、13h、34h 、58h 下的辣椒幼苗叶片进行转录组测序共得到高质量数据 203.32G 。各时间点下中性盐胁迫差异表达基因数量分别为 858、3121、1274、2263 个;碱性盐胁迫 差异表达基因数目分别为 601、3511、503、1075 个,两种盐胁迫的差异基因数目都在 13 h 达到峰

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