绵羊和山羊源性成分同步检测方法实时荧光PCR法编制说明.pdfVIP

编制说明 项目名称： 绵羊和山羊源性成分同步检测方法 实时荧光 PCR法 项目编号： 内质监标函〔 2018〕307 号 编制单位： 锡林郭勒职业学院 一、工作简况 本项目来源于 2018 年第 3 批内蒙古自治区地方标准制修订项目 （内质监标函〔2018〕307 号）。起草单位为锡林郭勒职业学院，协 作单位为锡林郭勒食品检验检测和风险评估中心。主要起草人：郭 梁、刘国强、于园、徐伟良、罗建兴、李春冬。 二、制定标准的必要性和意义 来源于绵羊和山羊的肉制品深受消费者的喜爱， 是农畜产品市场 中重要组成部分。 市场中存在用低价肉冒充绵羊和山羊肉等高价肉的 欺诈违法行为， 亟需制定针对肉乳制品的绵羊和山羊源性成分同步检 测方法。目前，已经存在六项羊源性检测方法标准：饲料中牛羊源性 成分的定性检测 定性聚合酶链式反应 （PCR）法 （GB/T 20190-2006）； 明胶中牛、 羊、猪源性成分的定性检测方法 实时荧光 PCR 法 （GB/T 25165-2010）；动物源性饲料中反刍动物源性成分 (牛,羊,鹿 )定性检测 方法 PCR 方法（ GB/T 21104-2007）；饲料中牛羊源性成分检测 实时 荧光聚合酶链反应法 （NY/T 1946-2010）；食品、化妆品和饲料中牛羊 猪源性成分检测方法 实时 PCR 法（ SN/T 2051-2008）；动物产品中 牛、山羊和绵羊源性成分三重实时荧光 PCR 检测方法（ SN/T 2980- 2011）。在采用上述检测标准后发现： 目前缺乏基于多重实时荧光 PCR 法、同管质量控制体系、 针对肉乳制品的绵羊和山羊源性成分同步检 测方法的相关标准。本标准是基于多重实时荧光 PCR 法、同管质量 控制体系、针对肉乳制品的绵羊和山羊源性成分同步检测方法的相关 标准，具有快速、高通量以及去除假阴性等特征。 三、主要起草过程 本标准制定工作从 2018 年 10 月开始，组织成立了标准起草团 队。起草团队首先进行相关标准、专利以及论文的收集和整理工 作，制定了基于多重实时荧光 PCR 法、同管质量控制体系、针对肉 乳制品的动物源性成分检测标准体系的研发目标，计划形成绵羊 （Ovis aries）、山羊（ Capra hircus ）、马（ Equus caballus）、黄牛 （Bos taurus）、水牛（ Bubalus bubalis）、牦牛（ Bos grunniens）、猪 （Sus scrofa）、驴（ Equus asinus）、双峰驼（ Camelus bactrianus）、 梅花鹿（ Cervus nippon）、鸡（ Gallus gallus ）、鸭（Anas platyrhynchos）及鹅（ Anser anser）等 13 个物种、针对肉（鲜肉、 肉干及香肠）和乳（鲜乳、发酵乳、乳酪及乳粉）的常见动物源性 成分检测标准体系。 具体实验过程如下： （一） 在 NCBI 中下载不同物种（绵羊、山羊、马、牛、水牛、 牦牛、猪、驴、双峰驼、梅花鹿、鸡、鸭及鹅等 13 个物种）的 线粒体序列。为了保证引物和探针的物种适用性，每个物种下载 5-20 个品种或品系的线粒体序列；利用生物信息学软件（ Clustal X 或 MAGE 5 ）对所下载的线粒体序列进行比对。筛选物种间特