病毒TCID50测定方案.docVIP

. 测定方案TCID50 2012112339 1 简介 TCID50(Tissue Culture Infective Dose)，半数组织培养感染量，又称50%组织细胞感染量，指能在半数细胞培养板孔或试管内引起细胞病变(Cytopathic effect，CPE)的病毒量。 将不同稀释度的病毒接种到96孔板上培养的单层细胞上。观察细胞病变，待细胞不再病变时记录每个稀释度出现病变和未出现病变的孔数，按照Reed-Muench公式计算TCID50值。 2 试剂 试剂 来源 保存条件 4 ℃保存 Gibco，上海DMEM-basic培养基-20胰蛋白酶 Gibco， ℃冻存 -20℃冻存 Hyclone， 胎牛血清Fetal bovine serum -20℃冻存， PBS Hyclone3 仪器与耗材 仪器 规格规格耗材 2 25cm 培养箱CO细胞培养瓶2 15mL，无菌离心管 50mL 生物安全柜 倒置显微镜一次性移液管 ，，2mL，5mL10mL 1mL 细胞培养板 孔 显微照相系统96 高速冷冻离心机 电子天平 移液器 液氮罐 电冰箱4 细胞及培养基 DF-1细胞株 细胞生长液（500mL）：20