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摘 要I
AbstractIII
1 文献综述1
1.1MYB转录因子在植物中生理学功能1
1.1.1MYB转录因子概况1
1.1.2 MYB转录因子参与调节气孔开闭1
1.1.3MYB转录因子参与植物次生代谢2
1.1.4MYB转录因子参与植物的非生物胁迫3
1.1.5MYB2转录因子研究进展4
1.2 木薯的研究现状5
1.2.1 木薯干旱胁迫响应机制研究现状5
1.2.2 木薯低温胁迫响应机制研究现状6
1.3 研究目的与意义7
2 材料与方法8
2.1 材料8
2.1.1 植物材料8
2.1.2 菌种与试剂8
2.2 方法9
2.2.1MeMYB2 基因表达分析9
2.2.2MeMYB2 亚细胞定位11
2.2.3 酵母双杂交Bait 诱饵载体(pGBKT7-MeMYB2)构建16
2.2.4 木薯cDNA 文库构建17
2.2.5 自激活实验和毒性实验17
2.2.6 进一步确定Bait 诱饵蛋白自激活活性的位置18
2.2.7Bait 诱饵载体(pGBKT7-MeMYB2760)筛选cDNA 文库19
2.2.8 候选Prey 酵母质粒提取与鉴定20
2.2.9 酵母双杂交回转验证试验22
2.2.10 BIFC 22
双分子荧光互补实验( )
I
木薯MeMYB2 转录因子功能研究
2.2.11 MeMYB2-Pro:pAbAi 23
构建酵母单杂交诱饵菌株( )
2.2.12 酵母单杂交报告基因本底表达水平检测25
2.2.13 酵母单杂交文库构建25
2.2.14 酵母单杂交cDNA 文库筛选互作蛋白27
2.2.15 酵母单杂交回转验证28
3 结果分析29
3.1 木薯MeMYB2 基因非生物胁迫表达分析和亚细胞定位29
3.1.1MeMYB2 在非生物胁迫下表达分析29
3.1.2MeMYB2 亚细胞定位31
3.2MeMYB2 基因的互作蛋白分析32
3.2.1 Bait pGBKT7-MeMYB2 32
构建酵母双杂交筛选 表达载体( )
3.2.2 高质量木薯cDNA 文库的构建32
3.2.3 毒性检测和自激活活性检测32
3.2.4 Bait pGBKT7-MeMYB2760 34
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