木薯MeMYB2转录因子功能研究.pdfVIP

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目 录 目 录 摘 要I AbstractIII 1 文献综述1 1.1MYB转录因子在植物中生理学功能1 1.1.1MYB转录因子概况1 1.1.2 MYB转录因子参与调节气孔开闭1 1.1.3MYB转录因子参与植物次生代谢2 1.1.4MYB转录因子参与植物的非生物胁迫3 1.1.5MYB2转录因子研究进展4 1.2 木薯的研究现状5 1.2.1 木薯干旱胁迫响应机制研究现状5 1.2.2 木薯低温胁迫响应机制研究现状6 1.3 研究目的与意义7 2 材料与方法8 2.1 材料8 2.1.1 植物材料8 2.1.2 菌种与试剂8 2.2 方法9 2.2.1MeMYB2 基因表达分析9 2.2.2MeMYB2 亚细胞定位11 2.2.3 酵母双杂交Bait 诱饵载体(pGBKT7-MeMYB2)构建16 2.2.4 木薯cDNA 文库构建17 2.2.5 自激活实验和毒性实验17 2.2.6 进一步确定Bait 诱饵蛋白自激活活性的位置18 2.2.7Bait 诱饵载体(pGBKT7-MeMYB2760)筛选cDNA 文库19 2.2.8 候选Prey 酵母质粒提取与鉴定20 2.2.9 酵母双杂交回转验证试验22 2.2.10 BIFC 22 双分子荧光互补实验( ) I 木薯MeMYB2 转录因子功能研究 2.2.11 MeMYB2-Pro:pAbAi 23 构建酵母单杂交诱饵菌株( ) 2.2.12 酵母单杂交报告基因本底表达水平检测25 2.2.13 酵母单杂交文库构建25 2.2.14 酵母单杂交cDNA 文库筛选互作蛋白27 2.2.15 酵母单杂交回转验证28 3 结果分析29 3.1 木薯MeMYB2 基因非生物胁迫表达分析和亚细胞定位29 3.1.1MeMYB2 在非生物胁迫下表达分析29 3.1.2MeMYB2 亚细胞定位31 3.2MeMYB2 基因的互作蛋白分析32 3.2.1 Bait pGBKT7-MeMYB2 32 构建酵母双杂交筛选 表达载体( ) 3.2.2 高质量木薯cDNA 文库的构建32 3.2.3 毒性检测和自激活活性检测32 3.2.4 Bait pGBKT7-MeMYB2760 34

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