绿豆中谷氨酸脱羧酶的性质及结构研究.pdfVIP

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2020-08-18 发布于江苏
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绿豆中谷氨酸脱羧酶的性质及结构研究.pdf

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目录目录摘要I 英文摘要III 1文献综述 1 1.1γ-氨基丁酸1 1.1.1生产来源及分布 1 1.1.2 GABA 的生理功能3 1.1.3 GABA 的检测方法5 1.1.4 应用前景5 1.2 谷氨酸脱羧酶6 1.2.1谷氨酸脱羧酶的来源及分布7 1.2.2 GAD 的生理功能9 1.2.3GAD 的结构9 1.2.4 应用前景 10 1.3谷氨酸脱羧酶与γ-氨基丁酸的关系10 1.4 植物中钙调素11 1.5立题背景及意义11 1.6研究的主要内容 13 2 材料与方法 14 2.1试验原料与设备 14 2.1.1原料与试剂 14 2.1.2 主要仪器设备 14 2.2 实验方法 15 2.2.1绿豆GAD 的提取及测定15 2.2.2 绿豆GAD 的制备与纯化16 2.2.3绿豆GAD 的酶学性质研究17 2.2.4 绿豆GAD 的结构研究19 2.2.5数据处理21 3. 结果与分析22 I 绿豆中谷氨酸脱羧酶的性质及结构研究 3.1绿豆GAD 的分离纯化22 3.1.1(NH ) SO 分级沉淀22 4 2 4 3.1.2DEAE-Cellulose 树脂分离纯化24 3.1.3葡聚糖凝胶Sephadex G-100 纯化绿豆谷氨酸脱羧酶25 3.1.4 GAD 分离纯化结果25 3.2 绿豆GAD 酶学性质26 3.2.1酸碱度对GAD 活性的影响26 3.2.2 温度对绿豆GAD 活性的影响27 3.2.3化学试剂和金属离子对GAD 活性的影响28 3.3绿豆GAD 的结构研究29 3.3.1绿豆GAD 酶活测定30 3.3.2 绿豆GAD 氨基酸组成30 3.3.3GAD 的二级结构31 3.3.4 GAD 的三级结构33 3.3.5Native法鉴定绿豆GAD 纯度并测定相对分子质量35 3.3.6绿豆GAD 分子量分布36 3.3.7MS法测定绿豆GAD 相对分子质量37 4. 讨论39 4.1绿豆GAD 的分离纯化39 4.2 绿豆GAD 酶学性质39 4.3绿豆GAD 的结构研究40 4.4 测定绿豆GAD 纯度和相对分子质量42 5. 结论与展望43 5.1结论43 5.2 创新点44 5.3展望44 参考文献45 致谢53 个人简历54 II Contents Contents Abstract in Chinese·····························································································Ⅰ Abstract inEnglish········································