BVDV非结构蛋白Npra介导泛素化降解ELF4的分子机制研究.pdfVIP

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2020-08-18 发布于江苏
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BVDV非结构蛋白Npra介导泛素化降解ELF4的分子机制研究.pdf

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目录目录摘要I AbstractIII 1 文献综述 1 1.1 引言 1 1.2 牛病毒性腹泻-粘膜病的研究进展1 1.2.1 流行病学 1 1.2.2 发病机理2 1.2.3 诊断2 1.2.4 病原学4 1.2.5BVDV 结构与功能4 1.2.6BVDV 引起的免疫反应6 1.3 天然免疫中的泛素化修饰7 1.3.1 泛素化修饰的简介7 1.3.2 泛素化修饰参与调控抗病毒天然免疫8 1.4 转录因子ELF49 1.4.1ETS家族的简介9 1.4.2ELF4 的功能10 1.5 热休克蛋白Hsp7012 1.5.1热休克蛋白Hsp70 的简介12 1.5.2Hsp70 系统在病毒生命周期中的功能13 1.6 研究的目的及意义 14 pro 2 牛病毒性腹泻病毒N 真核表达载体的构建及鉴定 17 2.1 材料 17 2.1.1 载体、细胞和病毒 17 2.1.2 主要试剂 17 2.1.3 主要仪器设备 17 2.2 方法 18 2.2.1细胞培养与病毒增殖 18 I BVDV 非结构蛋白Npro介导泛素化降解ELF4 的分子机制研究 2.2.2 病毒及细胞的RNA 提取及反转录19 pro 2.2.3BVDVN 基因的克隆及分析19 pro 2.2.4BVDVN 蛋白真核表达载体的构建21 2.2.5293T 细胞的转染23 pro 2.2.6 重组蛋白pcDNA3.1-N Westernblot 的鉴定23 2.3 结果24 2.3.1BVDVNADL 株接种MDBK 细胞结果24 pro 2.3.2N 基因PCR 的扩增25 pro 2.3.3 重组质粒pMD-18T-N 的鉴定25 pro 2.3.4BVDVN 蛋白生物信息学分析26 pro 2.3.5 真核表达产物pcDNA3.1-N 的鉴定27 pro 2.3.6 重组蛋白pcDNA3.1-N 的Westernblot 鉴定28 2.4 讨论29 2.5 小结30