盐胁迫下玉米种子萌发机理的新探索.pdfVIP

符 号 说 明 ABA: Abscisic acid, 脱落酸 Amp: Ampicillin, 氨苄青霉素 CTAB: Cetyltrimethylammonium bromide, 溴代十六烷基三甲胺 ddH O: Distilledant deonized water, 重蒸水 2 EDTA: Ethylene diaminetetracetic acid, 乙二胺四乙酸 GA: Gibberellic acid, 赤霉素 Hyg: Hygromycin B, 潮霉素 IAA: iodoacetamide ，碘乙酰胺 Kan: Kanamycin, 卡那霉素 PCR: Polymerase chain reaction, 聚合酶链式反应 qRT-PCR: Real Time quantitative reverse transcerption PCR, 实时荧光定量PCR SDS: Sodium dodecyl sulfate, 十二烷基硫酸钠 Spe: Spectinomycin, 壮观霉素 目录 中文摘要 1 Abstract 3 1.前言 5 1.1.植物种子的休眠和萌发 5 1.2.盐胁迫对种子萌发的影响 5 1.3.植物激素在种子萌发中的作用 7 1.3.1 脱落酸在种子萌发中的作用 7 1.3.2.赤霉素在种子萌发中的作用 8 1.3.3.脱落酸和赤霉素拮抗调控种子萌发 9 1.4.盐胁迫与脱落酸之间的关系 10 1.5.玉米中盐胁迫的研究进展 11 1.5.1.盐胁迫对玉米生长发育和矿质元素吸收的影响 11 1.5.2.盐胁迫对玉米光合作用及产量的影响 12 1.5.3.玉米对盐胁迫的响应 13 1.6.植物中胚和胚乳的信号传递 13 1.6.1.胚乳在种子萌发中的作用 13 1.6.2.胚乳对外界信号的响应 14 1.6.3.胚和胚乳之间的信号传递 14 1.7.本研究的目的和意义 15 2.材料与方法 17 2.1.材料 17 2.1.1.植物材料 17 2.1.2.载体与菌株 17 2.1.3.主要试剂 17 2. 1.4.网络信息资源 17 2.2.实验方法 17 2.2.1.种子播种萌发前的预处理 17 2.2.2.玉米种子的萌发和实验样品获取 18 2.2.3.统计玉米种子萌发率 18 2.2.4.植物基因组DNA 的提取 18 2.2.5.植物RNA 的提取以及反转录 19 2.2.6.PCR 扩增目的片段 20 2.2.7. 目的片段的胶回收 21 2.2.8.载体的构建 21 2.2.9.植物总蛋白的提取 26 2.2.10.沉淀蛋白质消化 27 2.2.11.胶内的蛋白质消化 28 2.2.12.实时荧光定量PCR 30 2.2.13.玉米中进行免疫荧光实验 31 3.结果与分析 32 3.1.玉米的萌发表型 32 3.2.种子萌发过程中大多数基因会发生可变剪切响应盐胁迫 34 3.3.SWATH-MS 定量蛋白质组学鉴定揭示了高盐度下蛋白质组的变化 36 3.4.NaCl 处理下ABA 和GA 相关基因分析 38 3.5.ABA 的免疫荧光揭示盐处理下玉米胚乳中新的信号转导机制 40 3.6.剪接因子和转录因子的差异剪切 43 4.讨论 45 4.1.在玉米中由胚乳感知盐信号 45 4.2.ABA 是玉米盐胁迫下萌发过程中的主要响应激素 45 4.3.可变剪切和蛋白调控在种子萌发过程响应早期盐胁迫的关键作用 45 4.4.盐胁迫下盐分感应与信号转导的模型 46 5.结论 47 参 考 文 献 48 致谢 55 攻读学位期间发表的论文及成果 56 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 玉米是我国乃至世界上种植最为广泛的粮食作物之一，种植面积仅次于小麦和水稻。 玉米在生产生活中扮演了非常重要的角色。种子萌发是一个受到多种因素调控的生物过 程，通过种子萌发，成熟种子的胚根可以穿破种皮萌发长成幼苗，玉米种子的萌发关系 到玉米产量的稳定。影响玉米种子萌发的因素有很多，包括植物激素、环境胁迫例如盐 胁迫等。而其中盐胁迫对玉米种子萌发的影响正是本实验研究的重点。我国的盐碱地