皱皮木瓜腐败微生物的分离鉴定及控制.pdf

符 号 说 明 CTAB: hexadecyltrimethylammonium bromide, 十六烷基三甲基溴化铵 DHE: dehydroergosterol, 脱氢麦角固醇 NA : nutrient agar medium, 牛肉膏蛋白胨培养基 NB: nutrient broth medium, 营养肉汤培养基 Nisin : nisin from streptococcus lactis, 乳酸链球菌素 PCR: polymerase chain reaction, 聚合酶链式反应 PDA: potato dextrose agar culture medium, 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 PDB: potato dextrose broth, 马铃薯葡萄糖肉汤培养基 Vc: vitamin C, 维生素C YPD: yeast extract peptone dextrose medium, 酵母浸出粉胨葡萄糖培养基 目录 中文摘要 I Abstract III 1 前言 1 1.1 皱皮木瓜的价值 1 1.1.1 皱皮木瓜的营养成分 1 1.1.2 皱皮木瓜的功能成分 1 1.2 常见的果品腐败微生物3 1.3 腐败微生物的分离纯化及鉴定方法4 1.3.1 分离纯化方法4 1.3.2 鉴定方法5 1.4 腐败微生物的控制措施6 1.4.1 低温控制6 1.4.2 辐照控制6 1.4.3 拮抗微生物控制6 1.4.4 抑菌剂控制6 1.5 本课题研究的目的意义及主要内容9 1.5.1 本研究的目的和意义9 1.5.2 本研究的主要内容9 1.5.3 技术路线 10 2 材料与方法 11 2.1 材料 11 2.1.1 试验原料 11 2.1.2 主要试剂 11 2.1.3 主要仪器设备 12 2.2 试验方法 12 2.2.1 皱皮木瓜腐败微生物的分离纯化 12 2.2.2 腐败微生物的鉴定 13 2.2.3 腐败微生物的控制 14 2.2.4 皱皮木瓜抑菌剂组合的优化 18 2.3 数据处理与分析20 3 结果与分析21 3.1 腐败微生物的分离纯化21 3.2 皱皮木瓜腐败微生物的鉴定22 3.3 皱皮木瓜腐败微生物的控制30 3.3.1 霉菌的控制30 3.3.2 细菌的控制36 3.3.3 皱皮木瓜抑菌剂组合的优化41 4 讨论47 4.1 关于引起皱皮木瓜腐败的微生物47 4.2 关于抑菌剂的抑菌机理47 4.3 关于腐败微生物控制技术48 5 结论50 参考文献51 附录60 致谢63 攻读学位期间发表的论文及成果64 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 皱皮木瓜含有丰富的营养及功能成分，具有独特的药用和保健价值，深受消 费者的喜爱，市场前景广阔。但是皱皮木瓜在贮藏过程中还存在微生物腐败、失 水失重、营养及功能成分损失等问题，致使其营养价值和食用、药用品质下降。 明确皱皮木瓜中的腐败微生物种类，并选择适宜的抑菌剂进行控制，对于皱皮木 瓜贮藏保鲜具有重要意义。本文采用组织分离法对引起皱皮木瓜腐败的微生物进 行分离纯化，并通过形态学和分子生物学等方法进行了鉴定，在此基础上，通过 筛选天然抑菌剂对其进行控制，确定了最优抑菌剂组合，主要研究结果如下： （1）采用组织分离法从腐败皱皮木瓜中初步分离出2株细菌和6株霉菌，没 有分离出酵母菌。回接试验结果表明共有2株细菌、3株霉菌能引起皱皮木瓜腐败。 （2 ）通过形态学及分子生物学对5株腐败微生物进行鉴定，结果表明：2株 细菌分别为巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium ）、假蕈状芽孢杆菌（Bacillus pseudomycoides ），3株霉菌分别为扩展青霉（Penicillium expansum ）、枝孢霉菌 （Cladosporium velox）、皮落青霉（Penicillium crustosum ）。 （3 ）纳他霉素是扩展青霉（Penicillium expansum ）、枝孢霉菌（Cladosporium v