原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
.
细胞 DNA 提取步骤
1. HCT116 细胞吸去培养基， PBS 洗两次。
2. 胰酶消化 2min 。
3. 2ml 培养基终止消化。
4. 全部吸入 15ml 离心管中，离心 300G3min 。
5. 弃去上清，用 3ml 冷的（ 4 °） PBS 重悬，离心。
6. 200ul 冷（ 4 °） PBS 重悬，转入 1.5mlEP 管，加入 25ul 的 OB ，涡旋混匀。
7. 加入 220ul 的 BL ，70 °孵育 10min 。（期间短暂的涡旋几次） 。
8. 加入 220ul 的无水乙醇，涡旋混匀。
9. 把液体全部转入柱子中（已套收集管） ，离心 10000rpm ， 1min 。
10. 弃滤液，加入 500ul 的 HBC （已加异丙醇），离心 10000rpm ， 1min 。
11. 弃滤液， 加入 500ul 的 DNA Wash Buffer （已加无水乙醇），离心 10000rpm ，1min 。两次。
12. 柱子室温干燥 2min 。
13. 弃套管， 柱子转到 1.5ml 微量离心管上， 加入 70ul 的 Elution Buffer （于 70°提前预热） ，
70°孵育 2min ， 10000rpm， 1min 。洗脱两次。
14.于 –20 °保存。
;.
文档评论（0）