核酸类检测试剂的原材料生产工艺和半成品.pdfVIP

附件 3 核酸扩增法检测试剂注册技术审查指导原则 一、前言 本指导原则主要针对核酸扩增类检测试剂的主要原材料、生产工艺 及反应体系、产品质量控制等环节提出指导性技术要求。 本指导原则系对核酸扩增法检测试剂的一般要求，申请人应依据产 品特性确定其中的具体内容是否适用，若不适用，需详细阐述其理由及 相应的科学依据。 本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审 批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法 规要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供详细的研究资料和验证 资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制订的， 随着法规和标准的不断完善、科学技术的不断发展，其相关内容也将进 行适时的调整。 二、适用范围 本指导原则适用于核酸扩增法检测试剂的注册技术审查，其他类核 酸检测试剂可参照相关内容。 三、基本要求 （一）基本原则 1.核酸扩增类检测试剂的生产企业应获得《医疗器械生产许可证》 。 研制、生产用的各种原料、辅料等应制定其相应的质量标准，并应符合 有关法规的要求。 — 23 — 2 ．试剂生产企业应具有与其技术要求相适应的人员、 厂房、设施和 仪器设备以及适宜的生产环境，配备满足核酸提取和扩增检测以及操作 人员防护所需的设备。建立专用实验室，实验室应当严格分区，人员和 物品应当单向流动，以最大限度地防止实验过程中样品之间的污染和避 免扩增产物的污染。生产用于病原微生物核酸检测的生产企业应建立符 合生物安全要求的设施和措施。 3.试剂生产企业应按照《体外诊断试剂生产实施细则（试行） 》的要 求，建立相应的质量管理体系，并应通过《体外诊断试剂生产企业质量 管理体系考核评定标准（试行） 》的考核。 4.核酸扩增类检测试剂的引物设计应当符合核酸检测设计的要求， 扩增体系应设定合理的内标和外标，试剂需设置抗污染的特定措施，扩 增产物须进行确证研究。 5.企业使用新型原材料时，应提供与通行原材料比对研究结果及相 关资料。使用未列入上述标准的化学试剂，应不低于分析纯。 （二）原材料 应提供主要原材料如引物、探针、企业参考品或标准品等的选择与 来源、制备过程、质量分析和质量标准等的相关研究资料。若主要原材 料为企业自己生产，其生产工艺必须相对稳定；如主要原材料来自市场 （从其他单位购买），应提供的资料包括： 对物料供应商审核的相关资料、 购买合同、供货方提供的质量标准、出厂检定报告，以及该原材料到货 后的质量检验资料。主要原材料（包括生产工艺）或其供应商发生变更， 应依据国家相关法规的要求进行变更申请。 核酸类检测试剂的包装材料和耗材应无脱氧核糖核酸酶（ DNase ） 和核糖核酸酶（ RNase ）污染。 1.脱氧三磷酸核苷（ dNTP ） 核酸的组成成分，包括： dATP 、dUTP 、dGTP 、dCTP 和 dTTP 。 — 24 — 应为高效液相色谱（ HPLC ）纯、 PCR 级，无 DNase 和 RNase 污染。 —20 ℃保存。 2. 引物 由一定数量的 dNTP 构成的特定序列，通常采用脱氧核糖核酸 （DNA ）合成仪人工合成，合成后经聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他适宜方 法纯化。 冻干粉，序列正确，合成量应达到试剂生产要求。纯度应达到电泳 级（ PAGE ）或 HPLC 级，不含杂带。应提供合成机构出具的合成产物 的质检证明，如 PAGE 电泳结果或 HPLC 分析图谱。 应作 HPLC 分析和紫外光吸收分析。以紫外分光光度计测定 OD260nm /OD 280nm 的比值在 1.6