氨基酸发酵技术2 009-教学课件（7条） 课件四培养基实罐灭菌操作.pptVIP

[例题1]有一个100m3发酵罐内装60m3培养基，升温至121℃时保温一段时间进行灭菌。每1mL培养基中有1.5×107个耐热细菌芽孢。灭菌过程中只考虑升温阶段100℃以后以及保温阶段的灭菌作用，已知温度从100℃上升至121℃需要21 min，求保温阶段的时间。（已知：A=1.34×1036 s-1，E=283460 J/mol） ? 解：已知：A=1.34×1036 s-1，E=283460 J/mol，可得 ?可计算出T1（=373K）至T2（=394K）之间的若干个k值，如表： ? 以表中计算的k值对T作图，可得k-T曲线： ?在图中，横坐标在T1~T2之间以2k为单位进行分解，纵坐标在0~0.0287之间以0.002 S-1为单位进行分解，单位面积（小方格）为2×0.002=0.004 k S-1，373~394K之间的k-T曲线以下的面积范围内包含36个单位面积，则有： ? 那么，升温阶段从373~394K的平均死亡速度常数可计算如下： ? 根据式，可计算升温阶段结束时培养基残留的芽孢数为： ? 可计算保温阶段所需的时间： * 《氨基酸发酵生产技术》 ---培养基及灭菌技术 课件四、培养基实罐灭菌操作技术 （一）关于实罐灭菌 实罐灭菌即将配制好的培养基 放在发酵罐或其它贮存容器内， 然后通入蒸汽，将培养基和设 备一起加热灭菌，再冷却至发 酵所要求温度的过程。 实罐灭菌在生产操作中属于间歇灭菌，俗称为“实消”。 （二）实罐灭菌步骤 灭菌前准备 拆检阀门 洗罐 排水 关闭各部件 重点检查底阀 空气过滤器灭菌 吹干 保压 灭菌过程操作-1 进料 预热 间接蒸汽预热至80℃左右 灭菌过程操作-2 关闭间接加热的蒸汽阀 保持列管的排水阀打开 从三路管道进蒸汽直接加热 放料管道 通风管道 取样管道 “由远至近”打开阀门 灭菌过程操作-3 罐顶所有能排汽的阀门 打开排汽 进料阀的小边阀 补料阀的小边阀 接种阀的小边阀 排汽阀 截止阀 灭菌过程操作-4 当温度升至100℃ 以上时，可从罐顶 各路管道进蒸汽。 灭菌过程操作-5 注意罐压、温度的变化， 调节进汽阀、排汽阀，使 罐压和温度保持相对稳定。 当温度升至121℃ 进入保温阶段 灭菌过程操作-6 保温结束 除了排风管路，关闭其它罐顶阀门 关闭三路进蒸汽阀门 进无菌空气保压 调节进气阀 和排气阀 使罐压稳定 “由近至远”关闭阀门 灭菌过程操作-7 进冷却水 降温 降温过程中，调节 进气与排气，使罐 压相对稳定。 （三）实罐灭菌计算 0.0330 0.0170 0.00864 0.00436 0.00217 0.00107 0.000522 0.000251 k（s-1） 394 391 388 385 382 379 376 373 T（K） 布置项目 *