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临床检验基础技术
粪便检验-隐血试验(OBT)
职业教育医学检验技术专业教学资源库
血红蛋白含有类似过氧化物酶的作用,催化供氢体,将供氢体中的氢转移给过氧化氢生成水,供氢体脱氢(氧化)后形成发色基团而呈色。呈色的深浅可反映血红蛋白量(出血量)的多少。
检测原理
检测方法
用竹签挑取少许粪便于滤纸片上,滴加邻联甲苯胺冰乙酸液2~3滴,再加H2O2(1mol/L)2 ~ 3滴,于标本上立即观察结果,报告。
根据出现颜色的时间及颜色的深浅来判读结果:
(-)2分钟后仍不显色
(+)10秒后由浅蓝渐变深蓝
(++)初显浅蓝褐色渐变成明显蓝褐色
(+++)立即呈现蓝褐色
(++++)立即呈现黑蓝色
结果示意图
除邻联甲苯胺法外还有以下化学方法:
邻甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、愈创木酯法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法等 。
影响因素
此操作简便易行,但缺乏特异性和准确性,常见的影响因素有
1、动物性食品因含有血红蛋白和肌红蛋白或其他酶,可使隐血试验出现假阳性。
2、大量生食蔬菜中含有植物光氧化物酶也可使结果出现假阳性。
3、如服用大量维生素C或其他具有还原作用的药物,则可使过氧化物酶被还原,不能再氧化色原物,故可出现假阴性。
4、血液在肠道中停留过久,血红蛋白被细菌降解也会导致假阴性等。
质量保证
试验前3天必须禁食动物血、肉、肝,是为了避免假阳性。禁服铁剂、维生素C是为了避免假阴性。
1
H2O2最好新鲜配制。
所用的器具要清洁。
每天做阳性对照和阴性对照。
2
3
4
主要方法:
酶联免疫吸附法
胶体金法
免疫斑点法
胶乳凝聚法
反向间接血凝法等
用胶体金(有颜色)等标记物标记抗人血红蛋白抗体,与粪便中的血红蛋白(红细胞内容物)结合,在指定位置出现颜色变化,根据颜色的有无及深浅判断阴性、弱阳性、阳性、强阳性。
胶体金法结果判读:
影响因素
此操作具有快速、方便、特异、灵敏和特异性高等优点
假阳性:因灵敏度而引起:1.胃肠道生理性失血(2ml/24h);2.服用刺激胃肠道的药物引起的消化道出血(2~5ml/24h)。
假阴性:消化道出血后,血红蛋白在胃肠道中被消化酶级细菌作用后分解而使免疫原性减弱、消失或改变。
主要用于下消化道出血检验,而40~50%上消化道出血不能检出;大量出血时,血红蛋白(抗原)浓度过高造成的与单克隆抗体不匹配(即后带效应),亦可出现假阴性。
质量保证
试验前3天必须禁食动物血、肉、肝,是为了避免假阳性。禁服铁剂、维生素C是为了避免假阴性。
1
每天做阳性对照和阴性对照。
2
03
参考值:阴性。
临床意义:粪便隐血试验阳性对消化道出血的诊断有重要的价 值。如消化性溃疡、药物(如阿司匹林、糖皮质激素、 吲哚美辛等)对胃黏膜的损伤、肠结核、克罗恩病、 溃疡性结肠炎、钩虫病、结肠息肉以及消化道肿瘤, 粪便隐血试验常为阳性。
参考值及临床意义
03
隐血试验可作为消化道肿瘤普查的一个筛选指标,其连续检测对早期发现结肠癌,胃癌等恶性消化道肿瘤具有重要价值。
例胃癌:早期符合率为20%
晚期符合率可高达95%
参考值及临床意义
谢谢,再见!
永州职业技术学院基础医学部
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