食品快速检测技术 1.1荧光定量PCR技术原理（有资料） 荧光定量PCR原理 PPT.pptxVIP

荧光定量PCR原理主讲：刘伟 食品营养与检测专业教学资源库 一 目录页基本概念二二定量原理数学原理 — 1 — 食品营养与检测专业教学资源库 基本概念一1.扩增曲线2.荧光阈值3.Ct值 — 2 — 食品营养与检测专业教学资源库 荧光定量PCR荧光基团激发光发射光-- 在PCR反应体系中加入荧光基团。-- 荧光基团在激发光的作用下，产生波长更长的发射光。-- 利用荧光信号的变化动态监测整个反应过程。 食品营养与检测专业教学资源库 1.扩增曲线（primary curve）线性图对数图扩增曲线：随着PCR反应的进行，扩增产物不断累积，荧光信号强度不断增加。每经过一个循环，收集一次荧光信号，通过荧光强度的变化监测扩增产物量的变化，从而得到扩增曲线图。纵坐标：Rn（荧光值） 横坐标：cycle number（循环数） 食品营养与检测专业教学资源库 2.荧光阈值（threshold）基线(baseline)：一般以PCR反应前15个循环的荧光信号作为本底信号荧光阀值(threshold)：扩增曲线上人为设定的一个值-- 缺省设置：PCR反应前3-15个循环荧光本底信号标准偏差的10倍-- 手动设置：大于样本的荧光背景值 食品营养与检测专业教学资源库 3.Ct 值(Cycle Threshold)Ct值：P