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无菌检测（薄膜过滤法）
1、用到的设备和仪器：
集菌仪，一次性集菌器，酒精灯，电子打火消毒喷枪，不锈钢镊子、无菌均
质袋 (无菌锥形瓶）、不锈钢剪刀、电子天平、玻璃注射液瓶
2、环境要求：检验前先开紫外灯和空调净化系统半小时。
3、供试液制备 :根据样品要求稀释。
4、过滤：先把集菌器硅胶管有挡头的一头放在集菌仪泵头外面，然后把硅胶管
压在泵头上。 （注意这里容易把硅胶管压破），针头和瓶口每次使用前都要用电
子打火消毒枪灼烧消毒。过滤供试液和冲洗液时按上集菌器上面的帽。供试液
和冲洗液过滤完后，拿下上面的帽，按上下面的堵头，用止血钳夹住两个集菌
器的硅胶管，向一个菌菌器中泵入 100ml 胰酪大豆胨液体培养基。打开止血钳，
夹住已注入培养基的集菌器硅胶管，向两个集菌器中各泵入 100ml 硫乙醇酸盐
流体培养基。放下装培养基的瓶子，打开集菌仪的泵头，距集菌器上口近端加
上夹子，从硅胶管分开处夹断，然后把断口按在集菌器上面有过滤膜的口上。
5、接种 :其中一个硫乙醇酸盐培养基接入小于 100cfu 的阳性菌 1ml，做为阳性对
照。 33 摄氏度培养 72 小时。
6、培养：硫乙醇酸盐流体培养基， 33℃培养 14 天。胰酪大豆胨液体培养基，
23℃培养 14 天。
注：此操作没有具体到品种，如果要具体到品种，样品加入量要根据产品特性
和批量来决定。培养基加入量要在符合药典和法规要求的同时通过方法验证来
得到。
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