K103 微生物学与操作技术 W2105细菌的革兰氏染色 KJ01 革兰氏染色.pptVIP

六.学生实操 布置工作任务 通过革兰氏染色法对 金黄色葡萄球菌和 大肠杆菌进行身份确定 七.微观世界“微电影” 八.革兰氏染色原理 革兰氏染色法为什么会将细菌分别染上不同的颜色？ G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，番红复染后呈红色。 第一步：结晶紫使菌体着上紫色 第二步：碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内。 第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应。 第四步：番红复染，增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌。 九.课后思考： 影响到革兰氏染色成败的关键因素有哪些？ 关键点： 严格掌握乙醇脱色程度，如脱色过度，则阳性菌被误染为阴性菌；而脱色不够时，阴性菌被误染为阳性菌。 菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间很长，或已死亡及部分自行溶解了，都常呈阴性反应。  请大家收拾好相关物品，检查好相关仪器，有序离开实训室。 今天要向大家说的这门课是商检技术专业的微生物检测技术这门课 《微生物检测技术》课程在我院开设历史悠久。商检专业自从2009年成立就有这门专业核心课程，现我将从八个方面对这门课程进行介绍。 * 革兰氏染色机制：目前一般认为，革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分基础上的一种物理原因。通过初染和媒染操作后，在细菌细胞的膜或原生质体上染上了不溶于水的结晶紫与碘的大分子复合物。革兰氏阳性细菌由于细胞壁较厚、肽聚糖含量较高且分子交联度紧密，在乙醇洗脱时，肽聚糖网孔会因脱水而明显收缩，在加上它基本不含类脂，故乙醇处理不能在壁上溶出缝隙，因此结晶紫与碘的复合物仍牢牢阻留在其细胞壁内使其呈现紫色。反之，革兰氏阴性细菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交联度松散，故遇乙醇后肽聚糖网孔不易收缩，加上它的类脂含量高，所以当乙醇把只类溶解后，在细胞壁上就会出现较大的缝隙，这样，结晶紫与碘的复合物就极易被溶出细胞壁，因此，通过乙醇脱色后，细胞又呈无色，这时再经沙黄等红色染料复染时即呈现红色。 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 细菌的革兰氏染色 主讲人：陈成 实验指导教师：郑萍、张睿 班级：12商检 革兰氏染色示范操作 1 2 实操 3 分析实验结果、学习原理 教学环节 一、学习目标 学习并掌握革兰氏染色法。 二、知识背景 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法。 1884年由丹麦医师Gram创立。通过革兰氏染色将细菌分成两大类，一类为革兰氏阳性菌（G+),镜检呈紫色；一类为革兰氏阴性菌，镜检呈红色。 三、实验材料 1.菌种培养物：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌 2.染料：草酸铵结晶紫液、路哥氏碘 液、95%乙醇、番红液。(革兰氏染色 剂1、革兰氏染色剂2、革兰氏染色剂3、革兰氏染色剂4） 3.其他：显微镜、载玻片、接种环、酒 精灯、无菌生理盐水、香柏油、二甲 苯、染液缸、玻片架。 四.方法与步骤 涂片→干燥→固定→草酸铵结晶紫染色（1min）→水洗→路哥氏碘液媒染（1min）→水洗→95%乙醇脱色（30s）→水洗→番红复染（2min）→水洗→干燥→镜检。 五.教师示范操作 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 工程技术学院 chench 今天要向大家说的这门课是商检技术专业的微生物检测技术这门课 《微生物检测技术》课程在我院开设历史悠久。商检专业自从2009年成立就有这门专业核心课程，现我将从八个方面对这门课程进行介绍。 * 革兰氏染色机制：目前一般认为，革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学