自身对照法计算杂质量.docVIP

1、自身对照现在用的很多，EP上有关物质很多都是自身对照法，自身对照法分两种：一种是加校正因子的，另一种是不加校正因子的。 通常不加校正因子包括两种情况，1》已知杂质的相对校正因子为0.8（0.9）~1.2（1.1），默认为1.0。2》未知杂质通常也默认为1.0。如果采用楼主所说的直接采用供试品溶液，那就是面积归一化法了。采用这种方式进行杂质定量的也有，这个要求主成分和杂质的峰面积在很宽的范围内都成线性（正常样品浓度和杂质限度水平浓度），满足这种情况的较少，但也有。例如我看到过埃索美拉唑镁的进口注册标准对于杂质的控制采用面积归一化法。这个方法多用于项目初期，没有对照品的情况下以及监控反应的进行程度。当上述情况不满足的情况下，就在很宽的范围内浓度与面积不呈线性。这时就有了自身对照法。这个方法的优点在于可以尽可能的提高样品浓度，提高杂质暴露的水平；稀释样品溶液至一定倍数，是主成分的浓度与样品中杂质的浓度尽可能接近，具体稀释多少视具体情况而定。通常稀释样品溶液100倍作为对照溶液进行杂质检测。也有例外，氢溴酸右美沙芬的稀释倍数是33.3倍。这个方法还有个优点，特别适合于未知杂质--因为不需要杂质对照品。但这个方法的缺点就是：运行时间长了（样品+对照溶液）。还有另外一个缺点就是：对于不太稳定的样品来说，在稳定性期间，随着主成分的降解，杂质的增加，采用这种方式会使杂质的检测结果偏大。等于间接提高了标准。 2、中国药典采样的方法为什么不是稀释1000倍而是稀释100倍？为什么把供试品稀释100倍作为对照溶液用，而不是用本品的法定对照品稀释100后作为对照溶液用？要知道法定的主成份对照品是不难买到的。 稀释100倍的供试液我们暂且称1%自身对照液，如果供试液中杂质峰面积不大于1%自身对照液主峰面积的0.5，就相当于供试液中杂质峰面积不大于供试液中主峰面积的0.5%.供试液的浓度很大，此时杂质含量高，峰形良好，但主成分峰可能都平顶了，面积无法计算，而1%自身对照液中主成分峰面积峰形可能都好，但是杂质含量太低，可能峰都没跑出来。所以才用1%自身对照液中主成分峰跟供试液中杂质峰比较。至于为什么用自身对照，不用杂质对照品，是因为有些杂质并不易得，买不到，还有一些杂质根本就是未知的，故不能用外标法定量杂质。主成分自身对照法分为两种，一种不加校正因子的，前提是假定杂质与主成分的响应因子基本相同，一般杂质与主成分的分子结构相似，响应因子不会差太多，但是还是有一定误差的。还有一种加校正因子的主成分自身对照法，在建立方法的时候需要用杂质对照品，算出校正因子，这样日常检验时就省去了杂质对照品，但是此时杂质的定位必须采用相对保留时间。