DNA提取及PCR扩增实验报告.pdfVIP

PCR 扩增及 DNA 琼脂糖凝胶电泳 刘琳 1131428 环境科学 一、实验目的 1．学习并掌握 PCR 扩增的基本原理与实验技术。 2 ．对扩增后的 DNA 进行琼脂糖凝胶电泳试验，并分析相应结果。 二、实验原理 1. PCR 扩增 多聚酶链反应 （PCR ）技术的原理类似于 DNA 的天然复制过程。 在微量离心管中加入 适量缓冲液，加入微量模板 DNA 、四种脱氧核苷酸（ dNTP ）、耐热 Taq 聚合酶及两个合成 DNA 的引物，而后加热使模板 DNA 在高温下（ 94 ℃）变性，双链解链，这是所谓变性阶 段。降低溶液温度，使合成引物在低温（ 55 ℃）与模板 DNA 互补退火形成部分双链，这是 所谓退火阶段。溶液反应温度升至中温（ 72 ℃），在 Tap 酶作用下，用四种 dNTP 为原料， 引物为复制起点， 模板 DNA 的一条双链在解链和退火之后延伸为两条双链，