《生物化学》教学课件：08 核酸化学.pptVIP

第五节 核酸的性质 一、核酸的一般性质 2. 性状 DNA为白色纤维状固体 RNA为白色粉末 第五节 核酸的性质 一、核酸的一般性质 3. 溶解度 不溶于一般的有机溶剂 微溶于水 核酸的钠盐在水中溶解度较大 第五节 核酸的性质 二、核酸的紫外吸收 核酸中碱基的共轭双键 紫外区有强烈吸收 （最大吸收峰在260nm附近） 核酸的定性/定量测定 紫外分光光度法 摩尔磷消光系数法 第五节 核酸的性质 二、核酸的紫外吸收 1. 紫外分光光度法 首先根据A260/A280的比值判断核酸样品的纯度 纯RNA：A260/A280=2.0 纯DNA：A260/A280=1.8 样品中含有杂蛋白或苯酚导致A260/A280比值降低 纯的核酸样品可根据260nm的光吸收值算出其含量 若260nm光吸收值为1： 相当于50μg/ml双螺旋DNA 或相当于40μg/ml单链DNA或RNA 或相当于20μg/ml寡核苷酸。 第五节 核酸的性质 二、核酸的紫外吸收 2. 摩尔磷消光系数法 ：摩尔磷消光系数 A：样品的光吸收值 C：每升溶液中磷的摩尔数 L：光径 （molar absorptivity） ∵ ∴ 知道了磷的含量就可知核酸的含量 在pH7.0时；DNA的 为～6600, RNA的 为7700～7800 1. 核酸浮力密度的测定 第五节 核酸的性质 三、沉降特性 经密度梯度沉降平衡法测出的密度 （covalently closed circular DNA, cccDNA） DNA双螺旋的扭曲形成超螺旋 三、DNA的三级结构 第三节 DNA的结构 3. 共价闭合环状双链DNA的超螺旋结构 三、DNA的三级结构 第三节 DNA的结构 3. 共价闭合环状双链DNA的超螺旋结构 互绕数(α) 螺旋圈数(β) 超螺旋数 (τ) 三、DNA的三级结构 第三节 DNA的结构 3. 共价闭合环状双链DNA的超螺旋结构 互绕数(α) 在双螺旋DNA中，一条链以右手螺旋绕另一条链缠绕的次数 三、DNA的三级结构 第三节 DNA的结构 3. 共价闭合环状双链DNA的超螺旋结构 互绕数(α) 螺旋圈数(β) 超螺旋数 (τ) 在双螺旋DNA中，一条链以右手螺旋绕另一条链缠绕的次数 在双螺旋DNA中螺旋的轮数 指DNA双螺旋绕超螺旋轴的次数 三、DNA的三级结构 第三节 DNA的结构 3. 共价闭合环状双链DNA的超螺旋结构 负超螺旋 正超螺旋 三、DNA的三级结构 第三节 DNA的结构 3. 共价闭合环状双链DNA的超螺旋结构 比连环差(?) L0：DNA处在共价闭合的松弛状态时的互绕数 L：变化后的互绕数 4. 开环DNA（open circular DNA, ocDNA） 也称松环DNA (relaxed circular DNA, rcDNA) 三、DNA的三级结构 第三节 DNA的结构 + 5. 连环DNA（Catenanes DNA） 单体 二聚体 三、DNA的三级结构 第三节 DNA的结构 DNA是主要的遗传物质，是遗传信息的载体 第三节 DNA的结构 四、DNA结构与功能的关系 基因指导蛋白质的合成 基因是DNA分子上的一段序列 DNA双螺旋结构提供了遗传信息传递的基础 第四节 RNA的结构 RNA的类别 tRNA的结构 rRNA的结构 mRNA的结构 RNA的一般结构 第四节 RNA的结构 一、RNA的类别 信使RNA（messenger RNA, mRNA） 转移RNA（transfer RNA, tRNA） 核糖体RNA（ribosomal RNA, rRNA） 不均一的核RNA（hnRNA） 核内小分子RNA（snRNA） 第四节 RNA的结构 二、RNA的一般结构 大多数天然RNA是一条单链，通过自身回折形成部分螺旋区，部分非螺旋区 第四节 RNA的结构 二、RNA的一般结构 大多数天然RNA是一条单链，通过自身回折形成部分螺旋区，部分非螺旋区 也有少数病毒RNA，如水稻矮缩病毒、呼肠孤病毒、伤瘤病毒等RNA是双链螺旋，类似于DNA的双螺旋结构。 RNA中双螺旋结构稳定的因素主要是碱基堆积力，其次是氢键 第四节 RNA的结构 三、mRNA的结构 1. mRNA的一级结构 mRNA前体 断裂、修剪、修饰 成熟mRNA （有功能的RNA） 1. mRNA的一级结构 真核生物mRNA的一级结构可用下式表示 : polyA 3′-非密码区 密码区 5′-非密码区 5′-帽子 第四节 RNA的结构 三、mRNA的结构 5′-cap：m7G(5′)ppp5’Np 第四节 RNA的结构 三、mRNA的结构 1. mRNA的一级结构