《微生物学》教学课件：03 病毒和亚病毒.pptVIP

⑤温度 在生长最适温度范围内最有利于吸附。 利用某些理化因子对吸附的促进作用和抑制作用，在发酵工业中对防止噬菌体的污染有一定的意义。 ④pH值 在中性时有利于吸附， 在pH＜5和pH＞10时不易吸附。 二、病毒感染的起始 定义：又称病毒内化，是一个病毒吸附后几乎立即发生的、依赖于能量的感染步骤。 机制：不同的病毒-宿主系统的病毒侵入机制不同 2. 侵入 二、病毒感染的起始 有尾噬菌体： 注射方式将噬菌体核酸注入细胞 通过尾部刺突固着于细胞； 吸附 尾钉固着 尾鞘收缩 尾管穿入 DNA注入 如果大量噬菌体在短时间内吸附于同一细胞上，使细胞壁产生许多 小孔，也可引起细胞立即裂解，但并未进行噬菌体的增殖，这种现 象称为自外裂解（lysis from without）。 尾部的酶水解细胞壁的肽聚糖，使细胞壁产生小孔； 尾鞘收缩，核酸通过中空的尾管压入胞内，蛋白质外壳留在胞外； 2. 侵入 二、病毒感染的起始 动物病毒： ① 裸露病毒穿过细胞膜的移位方式； ② 毒粒包膜与细胞质 膜的融合； 2. 侵入 ③ 细胞的内吞功能； 二、病毒感染的起始 植物病毒： 2. 侵入 通过因人为或自然的机械损伤所形成的微伤口进入细胞；或者靠携带有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器的昆虫取食将病毒带入细胞。 植物病毒一旦进入细胞后，增殖产生的子代病毒或病毒核酸可通过病毒编码的运动蛋白（movement protein）与胞间连丝的相互作用从受染细胞进入邻近细胞。 二、病毒感染的起始 定义：病毒侵入后，病毒的包膜和/或壳体除去而释放出病毒核酸的过程。 T-偶数噬菌体脱壳与侵入是一起发生的 动物病毒存在不同的结构类型和不同的侵入方式， 其脱壳过程也较复杂。 病毒的毒粒消失，失去原有的感染性。 脱壳是病毒基因组进行功能表达所必需的感染事件 3. 脱壳 二、病毒感染的起始 3. 脱壳 病毒基因组的表达与复制存在着强烈的时序性 病毒基因组进入胞内 宿主细胞的代谢发生改变 病毒利用宿主的生物合成机构和场所，使病毒核酸表达和复制， 产生大量的病毒蛋白质和核酸。 4. 增殖 第三节 病毒的复制 三、病毒大分子的合成 早期（early, immediate early） 次早期（delayed early） 晚期（late） 三、病毒大分子的合成 病毒生物合成的第一步 是病毒mRNA的合成 病毒复制所需要的病毒 特异性酶蛋白及蛋白质 外壳的合成 （5种核酸，6条途径） 第三节 病毒的复制 四、病毒的装配与释放 又称成熟(maturation)或形态发生(morphogenesis) 新合成的毒粒结构组分组装成完整的病毒颗粒的过程 5. 装配 T4噬菌体的装配是一个极 为复杂的自我装配的过程 四、病毒的装配与释放 烟草花叶病毒的装配： RNA穿过螺旋的中心孔并在生长端形成 一个可移动的环。 成熟的子代病毒颗粒依一定途径释放到细胞外的过程 病毒的释放标志病毒复制周期结束 6. 裂解（释放） 大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放 四、病毒的装配与释放 四、病毒的装配与释放 丝（杆）噬菌体（如M13或fd）不杀死细胞，子代毒粒以分泌方式 不断从受染细胞中释放，并同时完成毒粒的组装。 注意一点：病毒的装配与释放有时是同步进行的 四、病毒的装配与释放 有包膜病毒的装配与释放有时 也是同时完成的 四、病毒的装配与释放 有包膜的动物病毒是在从宿主细胞核芽出 或细胞质膜芽出的过程中裹上包膜而形成 包膜病毒 吸附 侵入 早期：病毒特异性酶的合成 病毒核酸复制 病毒结构蛋白质合成 装配 释放 病毒大分子合成 脱壳 第三节 病毒的复制 五、一步生长曲线（one step growth curve） 1939年，Max Delbruck Emory Ellis： E. coli / bacteriopage 1. 用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞； 2. 数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）； 3. 将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新释放 的噬菌体感染其它细胞； 4. 保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体含量 进行计数）； 5. 以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出 病毒特征性的繁殖曲线； 该实验标志着分子病毒学、分子生物学和分子遗传学的建立 Max Delbruck因此荣获1969年Nobel Prize 以适量的病毒接种于标准培养的高浓度的敏感细胞，待病毒吸附后，离心除去未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清处理病毒—细胞培养物以建立同步感染，然后继续培养并定时取样测定培养物中的病毒效价，并以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线，即一步生长曲线