BCA法测蛋白浓度资料.docVIP

【目的】：掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理。 【原理】： BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他 试剂组成的 试剂，混合一起即成为苹果绿，即BCA工作试剂。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2+还原为Cu+，一个Cu+螯合二个BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。 【操作】 标准曲线的绘制：取试管七支、编号，按下表操作： 【计算】 （一） 绘制标准曲线。 （二） 以测定管吸光度值，查找标准曲线，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。 （三） 再从标准管中选择一管与测定管光密度相接近者，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。 【优缺点】 (一) 操作简单，快速，45分钟内完成测定，比经典的Lowary法快4倍且更加方便； (二) 准确灵敏，试剂稳定性好，BCA试剂的蛋白质测定范围是20-200μg/ml，微量BCA测定范围在0.5-10μg/ml。 (三) 经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行，大大节约样品和试剂用量； (四) 抗试剂干扰能力比较强，如去垢剂，尿素等均无影响 【器材】 （一） 7220型分光光度计 （二） 恒温水浴箱 （三） 中试管7支 （四） 枪式移液管 【试剂】 1、 试剂A：1％BCA二钠盐 2％无水碳酸钠 0.16%酒石酸钠 0.4％氢氧化钠 0.95％碳酸氢钠 混合调PH值至11.25。 2、 试剂B：4％硫酸铜。 3、 BCA工作液：试剂A 100ml ＋ 试剂B 2ml混合。 4、 蛋白质标准液：用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配制成1.5mg/ml的蛋白质标准液。（纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定） 5、 待测样品：用双缩脲测定法的样品稀释而成。 此法测定蛋白质浓度，近些年被科研工作者广泛选用。目前BCA法的试剂盒市面有售。 总之，虽然蛋白质含量的测定方法很多，但是，还没有一个完美的方法。在选择测定方法时，可根据实验要求和实验室条件决定。 如何让小学生巧记英语单词 江苏省海安县明道小学 张如男 单词难记，不仅 枯燥无味，而且极易遗忘。特别我们小学生记单词，更是记的少忘得快。单词是英语教学的基础，如何指导小学生有效地记住单词，是小学英语教学的一个难点。这就要求教师在英语的课堂教学中注意教学方法，充分调动学生的学习积极性，把单词教学贯穿于娱乐之中，是学生学起来不感到枯燥、乏味，让单词教学过程充满生机与活力。 反复练读 当学生初步感受到了单词的读音后，即要进行有效的操练，以达到熟练掌握单词的目的。如果是个体简单的反复练读，必然易产生厌倦，疲劳，课堂气氛沉闷，不利于提高学生的积极性。可以群体参与，辅助游戏，力求多种形式，寓教于乐，让学生轻松学单词。 1.跟读。 即教师教读或者跟着录音读，这对于刚刚学习英语的小学生来说，非常必要。由于他们还没学习音标，还不能独立学习单词的发音，要掌握单词的发音，就必须先跟读。 2.指明读。 这是检测学生是否掌握了单词读音的一个好方法。老师教读之后，就可以针对性地点几个学生读一读，以检测学生是否掌握了该单词的发音。 3.开火车读。 即教师出示某一个单词，让某一组的同学一个接一个地读。这种方式的优点在于它能激发学生的竞争意识，同时也能帮助那些对单词发音掌握不太好的学生，让他们在听了别人的发音之后，及时更正自己的发音。 4.分组读。 分组读是一种常见的操练的形式，既可以分小组读，也可以分男女组读。学生在这种竞赛的氛围中进行操练，对单词掌握得比较牢固。 5.齐读。 齐读也是操练单词的一种常见方式。但要注意的是在齐读过程中教师要注意监控课堂，以防有些同学“滥竽充数”。 二、多途并用 就是综合看、听、读、写，逐一落实，系统地完成一个新单词的教学。看，就是看实物、玩具或图片，让学生了解所学单词所代表的事物之形，在大脑形成深刻印象，加快记忆。小学英语中的单词，大部分是表示具体的事物，抽象的很少。教师就可以通过实物、卡片或了了几笔的简笔画，把要学的单词展示在学生的面前，使学生有一种直观感受。如学习用品、交通工具、动物、水果等单词。听，就是听录音，让学生从听觉上正确感受单词的读音。读，就是拼读练习。教师把所学单词写在黑板上或卡片上，让学生拼读，掌握单词是由哪些字母组合而成的。写，就是在单词练读后，要求学生能在三线本上写出来，目的是检验学生对单词的掌握情况。 简析规律