蔬菜中亚硝酸盐含量测定.pdfVIP

菠菜叶中亚硝酸盐的测定 作者姓名 : 董素琴、杨玫、熊晔卿 通讯地址： 北京市昌平区朱辛庄北农路 7 号 电子邮件地址 : dongsuqinohyeah@163.com 1 实验思路 在肉类制品中为了保持其鲜红的色泽，通常使用发色剂，如硝酸盐或亚硝酸盐。亚硝 酸盐在酸性条件下产生的游离亚硝酸，与肉中的肌红蛋白结合，生成亚硝基肌红蛋白，呈 现稳定的红色化合物，致使肉呈鲜艳的亮红色，致使食品具有独特风味。然而我们日常生 活中所食用的菠菜中也含有亚硝酸盐，但是亚硝酸盐非人体所必需，摄入过多对人体健康 产生危害。而且亚硝酸盐又是致癌性氮亚硝基化合物的前体物，研究证明人体内和事物中 亚硝酸盐只要与酰胺类同时存在，就可能形成致癌性的亚硝基化合物。因此，严格控制亚 硝酸盐的摄入量十分重要。亚硝酸钠的 ADI 值为每千克体重 0 - 0.06 mg 。日常食用的菠 菜中亚硝酸盐的含量是否在安全范围内呢？本实验我们分别采用标准曲线法和标准加入法 来测定。 2 实验原理 试样经沉淀蛋白质后， 在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后， 再与盐 酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，于波长 550 nm 处比色，与标准比较定量。 3 试剂 3.1 亚铁氰化钾溶液：称取 l06.0 g 亚铁氰化钾 [K 4Fe(CN)6 ·3H2O] ，用水溶解，并稀 释至 l000 mL 。 3 2 2 3.2 乙酸锌溶液：称取 220.0 g 乙酸锌 [Zn(CH COO) ·2H O] ，加 30 mL冰乙酸溶于水， 并稀释至 l000 mL 。 2 4 7 2 3.3 饱和硼砂溶液：称取 5.0 g 硼酸钠 (Na B O ·10H O) ，溶于 l00 mL 热水中，冷却 后备用。 3.4 对氨基苯磺酸溶液 (4 g/L) ：称取 0.4 g 对氨基苯磺酸，溶于 l00 mL 20 ％盐酸 中。置棕色瓶中混匀，避光保存。 3.5 盐酸萘乙二胺溶液 (2 g/L) ：称取 0.2 g 盐酸萘乙二胺，溶解于 l00 mL 水中，混 匀后。置棕色瓶中，避光保存。 3.6 亚硝酸钠标准溶液：准确称取 0.1000 g 于硅胶干燥器中干燥 24 h 的亚硝酸钠， 加水溶解移入 500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于 200 μg 的 亚硝酸钠。 3.7 亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液 5.00 mL 置于 200 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当干 5.0 μg 亚硝酸钠。 3.8 氯化铵缓冲溶液 pH 9.6-9.7 ： 1L 容量瓶中加入 500 mL 水，准确加入 20.0 mL 盐 酸溶液，摇匀。准确加入 50 mL 氨水，用水稀释至刻度。 4 仪器 4.1 沸水浴 4.2 分光光度计 4.3 分析天平 5 分析步骤 5.1 试样处理 准确称取 10.0000 g 菠菜叶，研磨成匀浆，置于 50 mL 烧杯中，加 12.5 mL 硼砂饱和 液，搅拌均匀，以 70℃左右的水约 300 mL 将试样洗入 500 mL 容量瓶中，于沸水浴中加热 l5 min ，取出后冷却至室温，然后一面转动，一面加入 5 mL铁氰化钾溶液，摇匀，再加入 5 mL 乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置 0