12维生素B12地吸收曲线绘制与注射液地含量测定.pdfVIP

新乡医学院分析化学实验课教案首页 授课教师姓名及职称： 一、实验名称 维生素 B12 的吸收曲线绘制及注射液的含量测定 二、授课对象 药学 授课形式 实验教学 1 ．掌握分光光度计的使用方法 三、教学目标 2 ．掌握注射剂含量的测定和计算方法 3 ．熟悉测绘吸收曲线的一般方法 1 ．吸收曲线的绘制方法 四、教学内容 2 ．应用吸光系数法测定注射剂含量及计算方法 3 ．752 型紫外－可见分光光度计的使用方法 五、教学安排 1 ．讲解演示 40 min 与课时分配 2 ．学生操作 教师辅导 120min 1 ．吸收曲线的绘制方法 六、授课重点 2 ．752 型紫外－可见分光光度计的使用方法 1 ．752 型分光光度计光源的使用 七、注意事项 2 ．每次改变波长，需重新调 T 为 “0” 3 ．B12 应避光 八、授课方法 教师示范讲述，学生操作 九、使用教材 《分析化学实验》自编教材 十、教研室 主任签字 审查意见 新乡医学院化学教研室 年 月 日 实验 维生素 B12 的吸收曲线绘制及注射液的含量测定 一、实验目的 1. 掌握分光光度计的使用方法； 2. 掌握注射剂含量的测定和计算方法； 3. 熟悉测绘吸收曲线的一般方法。 二、实验原理 维生素 B 12是含 Co 的有机化合物，其注射液为粉红色至红色的澄明液体。要测定 B12 注射液的含量，可 以用紫外－可见分光光度法测定，用此法进行含量测定，必须知道 B 的 λ ， λ 可以通过绘制吸收曲线 12 max max 来得到。 吸收曲线：将不同波长的单色光依次通过被分析的物质，分别测得不同波长下的吸光度，以波长为横 坐标，以吸光度为纵坐标所描绘的曲线。吸光度最大时对应的波长为 λ ，在 λ 处测吸光度。 B 在 278 ， max max 12 361 ，550nm 处有最大吸收，在 λ 处测得 A ，根据吸光系数法可以求出注射液中 B 的含量。 max 12 吸光系数法： A=Ecl 实验中要求测 361nm 处的 A ，相应的吸光系数 E1% 为207 。 1cm 三、仪器与试剂 -1维生素 B 水溶液，维生素 B 注射 752 型紫外－可见分光光度计， 10mL 容量瓶， 5mL 吸量管； 0.1g L· 12 12 液 ( 市售品 ) 。 四、实验步骤 1 ．