生物竞赛生物化学33DNA复制顶级资的源生物化学原理.pptVIP

生物化学原理 分子生物学) 梧荣武 可指京大痨 NANJING UNIVERSITY  第三力三幸DNA复制  提纲 DNA复制的一般特征 参与DNA复制的主要酶和蛋白质 三.DNA复制的详细机制 1.以大肠杆菌为代表的细菌基因组DNA的“θ-复制” 系统 2.“滚环复制”系统 3.D环复制系统 4.真核细胞的细胞核DNA复制 5.古菌的DNA复制 四.DNA复制的高度忠实性 五,DNA复制的调节机制  DMA复制的一般特征 ①以原来的DNA两条链作为模板,四种dNTP 为前体,还需要Mg2+ ②作为模板的DNA需要解链 ③半保留复制 ④需要引物——主要是RNA,少数是蛋白质 ⑤复制的方向始终是5′→3 ⑥具有固定的起点 ⑦多为双向复制,少数为单向复制 ⑧半不连续性 ⑨具有高度的忠实性和进行性  sSSS 5 全保留复制 弥散性复制 半保留复制 DNA复制可能的三种方式  (Left) Matthew Meselson (b. 1930).(Right) Franklin W. Stahl (b 1929) 由 Meselson和Stah设计证明半保留复 制的实验被誉为生物学最美丽的实验  一直在 连续多代在N培 转移到N培养基上继续培养 基上生长的大 杆菌肠杆菌(F)F1代 F2代 裂解绌胞 裂解细胞 裂解细胞 抽取DNA 抽取DNA C8Cl密度 梯度离心 NN 1N15N Meselson f和stah的证明DNA半保留复制的实验流程  生长代数 0 0.3 0.7 1.0 H/L-DNA 1.5 八1.9L-DNA+HL-DNA 2.5 3.0 0与1.9 混合 0与4.1 混合 Meselson和 Stahl的实验结果  Meselson与Sth在42年以后在最初 他们相遇的一颗树下重逢时的合影  子代DNA,老第二轮复制还没有 链无3H标记 分离的子代DNA 新链有饪H标记。新合成的无H标记, 还浸有分离的子 亲代DNA代DNA,新合成 (无H标记)的带有标记。 dI PH]-dT 半保留 丰保留 dT 次DNA 复制和细肥分裂 第一次細胞分裂结束 同时开始第二次分裂 Taylor以蚕豆根尖细胞为材料、使用放射性同 位素证明真核细胞DNA也是半保留复制的实验。