水产品检测技术1 挥发性盐基氮的测定 挥发性盐基氮的测定-半微量定氮法.pptxVIP

挥发性盐基氮的测定——半微量定氮法主讲：刘伟 食品营养与检测专业教学资源库 一 目录页原理二试剂与仪器三四分析步骤计算 挥发性盐基氮的测定 蛋白质分解产生碱性含氮物质（氨、胺类），这类物质在碱性环境中易挥发，故称为挥发性盐基氮（TVB-N）。 挥发性盐基氮的含量与水产品的变质程度有关，能有效地反映水产品的新鲜度。 新鲜水产品、腐败变质水产品之间差异非常明显，并与感官变化一致，是常用评定水产品品质量的客观指标。 挥发性盐基氮的测定 参照标准：GB 5009.228-2016 食品安全国家标准 食品中挥发性盐基氮的测定 1. 半微量定氮法 2. 自动凯氏定氮仪法 3. 微量扩散法 一、原理 蛋白质在酶和细菌的作用下分解后产生碱性含氮物质，有氨、伯胺、仲胺等，此类物质具有挥发性，可在碱性溶液中被蒸馏出来，用标准酸溶液滴定，计算含量。 二、试剂和仪器 1.试剂 ①氧化镁混悬液 （1%） ②2%硼酸溶液（吸收液） ③三氯乙酸溶液(20g/L) ④盐酸标准滴定溶液(0.1000 mol/L)或硫酸标准滴定溶液(0.1000 mol/L):按照GB/T601制备。 ⑤0.0100mol/L盐酸标准溶液或0.0100mol/L硫酸标准溶液。临用前用④配制。甲基红乙醇溶液(1g/L):称取0.1g甲基红,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL酚甲绿乙醇溶液(1g/L):称取0.1g溴甲酚绿,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L):称取0.1g亚甲基蓝,溶于95%乙醇,用95%乙醇稀释至100mL。混合指示液:两种任选其一 1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。 2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合。2.仪器①半微量定氮装置②微量滴定管：最小分度0.01mL2.仪器①半微量定氮装置②微量滴定管：最小分度0.01mL三、分析步骤①样液的制备： 鲜(冻)海产品和水产品去除外壳、皮、头部、内脏、骨刺,取可食部分,绞碎搅匀。制成品直接绞碎搅匀。鱼粉、鱼松、可直接使用。 鲜(冻)样品称取试样20g, 鱼粉、鱼松等干制品称取试样10g。置于具塞锥形瓶中,准确加入100.0mL水,不时振摇,试样在样液中分散均匀,浸渍30min后过滤。 滤液应及时使用,不能及时使用的滤液置冰箱内0℃~4℃冷藏备用。对于蛋白质胶质多、粘性大、不容易过滤的特殊样品,可使用三氯乙酸溶液替代水进行实验。②蒸馏、吸收： 将盛有10mL吸收液并加有5滴混合指示剂的锥形瓶置于冷凝管下端，并使其下端插入锥形瓶内吸收液的液面下。 精密吸取10mL上述样品滤液于蒸馏器反应室内，加5mL 1%氧化镁混悬液，迅速盖塞，并加水以防漏气。 夹紧螺旋夹，通入蒸汽，开始蒸馏。蒸馏5min后移动蒸馏液接收瓶,液面离开冷凝管下端,再蒸馏1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部,取下蒸馏液接收瓶。③滴定： 以盐酸或硫酸标准滴定溶液(0.0100mol/L)滴定至终点。 使用1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液混合指示液,终点颜色至紫红色。 使用2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液混合指示液,终点颜色至蓝紫色。 同时做试剂空白。四、计算 式中：X ——样品中挥发性盐基氮的含量，mg/100gV1——测定用样液消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，mLV2——试剂空白消耗盐酸或硫酸标准溶液体积，mLc——盐酸或硫酸标准溶液的摩尔浓度，mol/L四、计算 式中：m——样品质量，gV ——准确吸取的滤液体积, mL,本方法中V=10;V0 ——样液总体积, mL,本方法中V0=100;14——1N盐酸或硫酸标准溶液1mL相当氮的毫克数（结果保留3位有效数字） 感谢指导 期待合作